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蛋白質結晶方法

結晶方法(Crystallization Techniques)1.1.1 分批結晶(Batch Crystallization) 這是老的簡單的結晶方法，其原理是同步地在蛋白質溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達到一個高過飽和狀態。幸運的話，不需進一步處理即可在過飽和溶液中逐漸長出晶體。一個用于微分批結晶的自動化系統已被Chayen等人設計出（1991，1992），其微分批方法中，他們在1-2μl包含蛋白質和沉淀劑的液滴中生長晶體。液滴被懸浮在油（如石蠟）中，油的作用是作為封層以防止蒸發，它并不干擾普通沉淀劑，但是干擾能溶解油的(Chayen, 1997; see also Chayen, 1998)。

蛋白質晶體板制作

設計并制作了一種在微腔中對蛋白質進行微批量法(microbatch)結晶的碟式微流控結晶芯片,它是一種高通量、低成本、低耗樣量(納升級)、操作簡便的蛋白質結晶篩選方法,這種芯片能成功地結晶溶菌酶(lysozyme)和青色熒光蛋白(CyPet).為了系統地比較這種微流控芯片與傳統的使用蒸汽擴散法的24孔結晶板的結晶能力,用3個Hampton結晶試劑盒,在4℃及20℃培養條件下分別對5種標準蛋白(溶菌酶(lysozyme)、木聚糖酶(xylanase)、脂肪酶B(lipase B)、葡萄糖異構酶(glucose isomerase)和嗜熱菌蛋白酶(thermolysin))進行了結晶篩選實驗.結果表明,在4℃時微流控芯片與24孔結晶板有相近數目的結晶條件(91 vs 98)。

蛋白質結晶板

本發明涉及一種蛋白質結晶板,包括結晶板主體部分(10),以及在結晶板主體上以陣列形式分布的儲槽單元(20),每一所述儲槽單元(20)具有面板(240),在所述面板中間位置形成一凹槽,所述凹槽底部為第二面板(250),在所述第二面板中間位置或靠近一側的位置凹入形成儲槽(220),所述儲槽(220)至少一側的第二面板(250)中形成有至少一個滴液槽(230)。

這是老的簡單的結晶方法，其原理是同步地在蛋白質溶液中加入沉淀劑，立即使溶液達到一個高過飽和狀態。幸運的話，不需進一步處理即可在過飽和溶液中逐漸長出晶體。一個用于微分批結晶的自動化系統已被Chayen等人設計出（1991，1992），其微分批方法中，他們在1-2μl包含蛋白質和沉淀劑的液滴中生長晶體。