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              發(fā)布時(shí)間:2021-08-30 21:31  

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              重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù)基于重組酶聚合酶介導(dǎo)的擴(kuò)增原理,體外模擬生物體內(nèi) DNA 復(fù)印,在恒溫條件下即可對(duì)目的片段進(jìn)行擴(kuò)增,特別適用于快速檢測(cè),特別適用于體外診斷、獸醫(yī)、食品安全、生物安全、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域,已被成功應(yīng)用到多種病原的快速檢測(cè)上。




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              除前期的樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、滅活等處理,核酸檢測(cè)產(chǎn)品在檢測(cè)過(guò)程中主要分為2個(gè)步驟,即核酸提取、擴(kuò)增檢測(cè)。擴(kuò)增檢測(cè)部分主要取決于前步驟核酸提取的純度,以及擴(kuò)增儀器的性能,因此核酸檢測(cè)產(chǎn)品本身的差異性關(guān)鍵在于“核酸提取”這一步。



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              一種基于CRISPRCas的常溫等溫快速檢測(cè)核糖核酸的技術(shù)及檢測(cè)方法.本發(fā)明旨在生物體外利用公開(kāi)的多種基因工程酶與化學(xué)組分進(jìn)行核糖核酸擴(kuò)增,并通過(guò)一種或多種核酸酶,在常溫等溫條件下實(shí)現(xiàn)快速,一步或兩步的完成特定核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)的擴(kuò)增與檢測(cè)過(guò)程,使對(duì)各種核酸的檢測(cè)更快速和更簡(jiǎn)便.包括以下步驟:(1)通過(guò)核酸提取得到待檢測(cè)樣本的RNA或單鏈DNA或雙鏈DNA;(2)利用逆轉(zhuǎn)錄酶,轉(zhuǎn)錄酶,核糖核酸酶H,CRISPR相關(guān)蛋白13的組合酶以及核酸熒光探針與待檢核酸在等溫進(jìn)行反應(yīng),若待檢測(cè)核酸為DNA,在反應(yīng)前增加預(yù)變性的步驟;(3)通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào),判斷待檢測(cè)樣本中是否存在目標(biāo)核酸。



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