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  關于抗體的選擇

蛋白特異性：針 對需要檢測的蛋白查找抗體，幾個細節要區分，重組表達的蛋白和內源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不一樣的，注意查看抗體說明書的檢測說明。如果重組蛋白不 是全長表達，則需要注意抗體的免yi原區域是否在重組蛋白區域內。內源性蛋白能清楚其剪切與修飾的方式，特殊表型的蛋白需要進行序列比對，并結合抗體免 yi原序列，查看交叉反應的情況。磷酸化蛋白檢測需要確定具體位點，不同位點的磷酸化意味著可能有不同的機制存在，不宜一概而論。

抗體保存注意事項：大部分抗體的運輸條件：一般的運輸過程需要1-2 周的時間，所以是在4 度的條件下來完成的。4 度運輸zui主要的目的是為了避免反復凍融對抗體活性的損害(如果使用干冰運輸，那么收到時抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍。這就多了一次凍融的過程)。所以運輸過程中避免干冰運輸！特殊抗體的保存條件：1. 酶聯抗體：永遠保存在4 度，避免凍起來。否則會導致酶活性的下降或者喪失。2. 偶聯抗體：所有偶聯抗體都是在棕色管中或使用錫箔紙避光保存。尤其是熒光抗體，對光極為敏感，因此在所有的實驗階段也是要避光操作的！

   如何避免血清中沉淀物的出現？

   首先要注意正確的血清解凍步驟，而且溶解過程中一定要每隔一段時間均勻而緩慢的搖動血清。我們已經發現在下列情況下沉淀物可能增加，使用中應該盡量避免：（1）熱滅huo血清；（2）在 37℃下培養血清；（3）反復凍融；（4）γ射線照射；（5）長期儲存在 2-8℃；（6）在室溫下放置時間過長。

    如何去除血清中的沉淀？

    如想去除這些絮狀沉淀物，可以將血清分裝到無菌離心管中，以 400g 離心，上清液即可直接加入到培養基內一起過濾。注意：不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因為這可能阻塞濾膜。