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發(fā)布時(shí)間：2020-12-29 08:27
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生物緩沖劑Tris被人熟知的應(yīng)用，就是用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑以及生物緩沖劑。Tris-HCl，NaCl，tween20這三種物質(zhì)可組成TBST緩沖液，是做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液；Tris-HCl中加入EDTA可制成TE緩沖液，可用于DNA的穩(wěn)定和存儲(chǔ)；將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成，可獲得TAE緩沖液，換成硼酸可獲得TBE緩沖液，這兩種緩沖液常用于核酸電泳實(shí)驗(yàn)中。
Tris-HCl試劑桶裝。Tris、Tris鹽酸鹽、Tris-HCl緩沖溶液即用型pH值區(qū)別：1、Tris或Tris堿pH值為10-12，呈弱堿性；2、Tris鹽酸鹽pH值為4-6，呈弱酸性（有些產(chǎn)品為T(mén)ris與其鹽酸鹽的混合粉末，pH會(huì)有所上升）；3、Tris-HCl緩沖溶液通常是按一定的Tris與HCl比例配置好的即用型緩沖溶液，pH值取決于兩者比例，常用的有7.4,7.6,8.0,8.8等，一般呈近中性，偏弱堿性。
此外，回收時(shí)也緩沖系統(tǒng)進(jìn)行電泳。但是，TAE的缺點(diǎn)是緩沖容量小，除非有循環(huán)裝置使兩極的緩沖液得到交換，否則長(zhǎng)時(shí)間電泳是不可選用的。TBE緩沖液 酰胺實(shí)驗(yàn)以及瓊脂糖凝膠電泳將調(diào)節(jié)pH值的酸溶液換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”（Tris/Borate/EDTA）。TBE Buffer是分子實(shí)驗(yàn)中常用的緩沖液，由Tris和硼酸、EDTA組成，所以簡(jiǎn)稱(chēng)為T(mén)BE buffer。
后，可以通過(guò)添加一些穩(wěn)定劑到蛋白純化緩沖液中，以幫助提高蛋白純化時(shí)的溶解度和穩(wěn)定性。在緩沖液中添加惰性蛋白BSA某種程度可以穩(wěn)定蛋白，但必須確保這些加入的穩(wěn)定蛋白不干擾實(shí)驗(yàn)。有時(shí)添加甘油、聚乙二醇等添加劑可以增加緩沖液粘度，有助于防止蛋白聚集。另外，使用少量的表面活性劑和一些離子化合物如硫酸鹽、氨基酸、檸檬酸等可以屏蔽蛋白間的離子相互作用，幫助蛋白溶解。
