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發布時間:2020-12-17 06:22  
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廣州碩譜生物科技有限公司SPE專用柱選擇
固相萃取技術的復雜、難搞也是人所共知,下面列舉了一些固相萃取操作中的常見的問題及解決辦法,希望能對你的固相萃取操作有所幫助。
以下是固相萃取操作中常見的問題:
一、回收率低;
二、萃取重現性差;
三、凈化效果不理想;
四、SPE柱流速過低。
正相作用機理:
常見的極性固定相萃取材料包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土及含有qing基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2OH)的鍵合硅膠。
正相固相萃取模式下,溶劑體系的極性應按照樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序逐漸升高,它們的洗脫強度也逐漸增大。必須保證選擇的樣品溶劑不能將目標化合物洗脫,選擇的淋洗液應在不洗脫目標化合物的前提下zui大限度地洗脫干擾物,所以洗脫液應能恰好完全洗脫目標化合物。
對SPE柱進行合理的處理
在 SPE柱中,吸附劑可能存在少量干擾物,有效活化可避免干擾物進入洗脫液中,活化溶液應選擇整個洗脫過程中洗脫強度zui高的溶劑體系;在反相模式下,從樣品溶液到洗脫液的過程主要涉及到0%-100%甲1醇水溶液,因此應選擇純甲1醇活化溶液,而在目標化合物需要用甲1醇-甲ji叔丁基醚混合液洗脫時,則應選擇純甲ji叔丁基醚溶液;在正相模式下,從樣品溶液到洗脫液的過程主要涉及到0%-100%正己烷-甲ji叔丁基醚溶液的過程,因此活化溶液應選擇純甲ji叔丁基醚溶液。
色譜柱技術的差距在哪里?
答:色譜柱技術包括填料技術和裝柱技術,填料技術自不待言,填料的好壞對色譜柱分離性能和選擇性有決定性影響。裝柱技術也沒有想象中的這么簡單,不同固定相、不同粒徑、不同柱管內徑和長度,裝柱工藝都有所不同,要裝出緊密、穩定、均一的柱床,更多是一門藝術,需要經驗積累。
國內和國外想比,我認為色譜柱的差距在于:國內公司以前都不會自己開發填料,一般買國外現成填料裝柱,買到的填料質量控制權不在自己手里。另外因為裝柱歷史短,經驗積累少,裝柱工藝也沒有完全達到國外水平。另外,對色譜柱性能很關鍵的基礎材料-----裸硅膠,國產的還不過關,在純度、粒徑和孔徑的均一性方面和國外產品相比,差距很大。