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              博日養豬場核酸提取純化常用解決方案

              發布時間:2020-11-16 13:51  

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              廣州勱博儀器有限公司產品服務包括:非洲病毒檢測、核酸提取純化、PCR、熒光定量PCR、檢測、非洲檢測、全自動核酸提取純化系統、病毒核酸提取系統、非洲病毒快速檢測試劑盒。我們的客戶對象是食品企業/公司/廠、食品加工企業/公司/廠、冷凍食品加工企業/公司/廠、養殖場、養豬場、屠宰場、生豬屠宰場。在實時PCR中,反應是在目標的擴增最早被監測到時用循環中的時間點來描述的,而不是在PCR結束時通過目標的累計數來描述。

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              一、在動物檢疫中對生豬及其產品開展非洲病毒檢測,應當使用我部批準或經中國動物疫病預防控制中心比對符合要求的檢測方法及檢測試劑盒(試紙條),確保檢測結果準確。符合要求的檢測方法及檢測試劑盒(試紙條)可從中國動物疫病預防控制中心網站查詢。二、應急期間,比對符合要求的檢測試劑盒(試紙條)可使用至2019年6月30日。根據應對流行性腹瀉病毒的經驗,在不影響動物性能和飼料成本的情況下,替換原料的可行性使得很多生產者不再使用豬源原料。三、各地畜牧獸醫管理部門要加強對非洲病毒檢測試劑盒(試紙條)生產企業及其產品質量監管,確保產品質量符合要求。


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              豬肉制品加工企業在生豬產品原料中檢出非洲病毒核酸陽性的,應當立即封存陽性樣品的同批次原料并報告所在地市場監管、畜牧獸醫部門,并將陽性樣品送至具有檢測資質的單位復檢。復檢為陽性的,企業要在當地市場監管、畜牧獸醫部門監督下,按規定對同批次生豬產品原料進行無害化處理,對相關場所進行徹i底清洗消毒。生豬屠宰廠(場)連接著生豬產銷等上下游環節,便于“順藤摸瓜”及時發現和追溯潛在風險。


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              一個豬場對進場人員的衣物進行熏蒸消毒,專門制作了一個消毒柜,但由于開始設計不理想,消毒柜太大,無法進入屋內,就放在了舍外。夏秋季節消毒沒什么問題,但到了冬天,他們仍然在舍外熏蒸消毒,這樣的效果是很差的。廣州勱博--冷凍食品加工企業/公司/廠核酸提取純化一般而言,熒光擴增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段,熒光信號指數擴增階段和平臺期。還有的在入舍消毒池中,只是例行把水和火堿放進去,也不攪拌,火堿靠自身溶解需要較長時間,那剛放好的消毒水的作用就不確實了。

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              現有數據表明,在豬日糧中,豬流行性腹瀉病毒和其他外來病毒等能很好存活的原料包括:豆粕、酒糟、豬源蛋白質、維生素預混料、氨化膽i堿、L-賴氨酸和DL-蛋氨酸。如果其他尚未被評估的原料符合以下標準就更有利于病毒存活:蛋白質含量高(特別是天然蛋白質)、豬源、相對表面積較大質量(比)、含有載體的微成分。該技術是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料來實現其定量功能的。值得注意的是,這些原料并非具有相同的污染風險。


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              在real-time Q-PCR技術中,無論是相對定量還是標準曲線定量方法仍存在一些PCR定量方法均有的問題有待解決。在標準曲線定量中,標準品的制備是一個必不可少的過程。目前由于無一統一標準,各個實驗室所用的生成標準曲線的樣品各不相同,致使實驗結果缺乏可比性。②操作簡單、用時短,整個提取流程只有四步,大多可以在36-40分鐘內完成。此外,用real-time Q-PCR來研究mRNA時,受到不同RNA樣本存在不同的逆轉錄(RT)效率的限制。在相對定量中,其前提是假設內源控制物不受實驗條件的影響的,合理地選擇合適的不受實驗條件影響的內源控制物也是實驗結果可靠與否的關鍵。

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              與傳統的PCR技術相比,Real-time Q-PCR的不足之處是:(1)由于運用了封閉的檢測,減少了擴增后電泳的檢測步驟,因此也就不能監測擴增產物的大小;熒光定量PCR技術是在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號隨著PCR反應的積累來實時監控PCR反應的進程,并通過分析軟件對PCR的反應進行檢測分析的技術。(2)因為熒光素種類以及檢測光源的局限性,從而相對地限制了real-time Q-PCR的復合式(multiplex)檢測的應用能力;(3)目前real-time Q-PCR實驗成本比較高,從而也限制了其廣泛的應用。


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              目前全世界都沒有有效的非洲i疫i苗進行預防,現在有效的防控方法仍然是對非洲病毒進行檢測,根據檢測結果,對發生疫情的地方嚴防死守,對疫點地區生豬全部撲殺,進行無害化處理,防止疫情的擴散。農i業部要求豬場、飼料廠和屠宰廠和流通環節必須進行非洲病毒檢測。豬場、飼料廠、屠宰廠和流通環節用我們的ASFV LAMP現場可視化快速檢測試劑盒對非洲病毒進行現場檢測。根據檢測結果,對發生疫情的地方嚴防死守,對疫點地區生豬全部撲殺,進行無害化處理,防止疫情的擴散。在反應體系中加入熒光分子,通過熒光信號的按比例增加來反應DNA量的增加,使PCR產物的實時檢測成為可能。從而對非洲進行有效的防控。i大限度減少養殖戶經濟損失。

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              PCR檢測同熒光PCR類似,都是使用的引物和探針以VP72編碼區域作為靶基因設計,該基因研究清楚,且高度保守,即使在滅活或降解的樣品中也可檢測到已知所有22種p72病毒基因型的多個毒株。PCR檢測雖不需要熒光顯微設備,但也需要相關設備,可以代替病毒分離鑒定的一種靈敏、特異、快速非瘟檢測技術。熒光定量PCR結果可以用于定性(判斷一段序列的有無),也可以用于定量(確定DNA拷貝數),即qPCR,而常規PCR只能做半定量。


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