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大腸菌群的測定意義

糞便污染的指標細菌早在1892年，沙爾丁格(Schardinger)氏首先提出大腸作為水源中病原菌污染的指標菌的意見，因為大腸是存在于人和動物的腸道內的常見細菌。一年后，塞烏博耳德“斯密斯(Theobold．Smith)氏指出，大腸因普遍存在于腸道內，若在腸道以外的環境中發現，就可以認為這是由于人或動物的糞便污染造成的；從此，就開始應用大腸作為水源中糞便污染的指標菌。據研究發現，成人糞便中的大腸菌群的含量為：108個／g一109個／g。若水中或食品中發現有大腸菌群，即可證實已被糞便污染，有糞便污染也就有可能有腸道病原菌存在。根據這個理由，就可以認為這種含有大腸菌群的水或食品供食用是不安全的。所以目前為評定食品的衛生質量而進行檢驗時，也都采用大腸菌群或大腸作為糞便污染的指標細菌。當然，有糞便污染，不一定就有腸道病原菌存在，但即使無病原菌，只要被糞便污染的水或食品，也是不衛生的，不受人喜歡的。

水中微生物快速檢測儀的基本原理

　　主要包括真空系統、真空快速進換樣系統、光學系統、離子源、飛行時間質量分析器及數據采集系統。原理：激光照射樣品與基質形成的共結晶薄膜，基質從激光中吸收能量傳遞給樣品分子，而使樣品氣化電離。離子經同一電場加速后，由于其質量數的不同而進入飛行時間質量分析器的速度不同得到分離檢測。由于激光能量大部分被基質吸收，主要產生分子離子，而較少有碎片離子產生，因此可以直接對蛋白、多肽、DNA等生物大分子進行分析。具備高靈敏度、高準確率、高分辨率和高通量等優點，特別適用于生物混合樣品分析。

多管發酵法測定水中大腸菌群的操作方法

池水、河水或湖水①稀釋水樣：將水樣稀釋成10-1與10-2。②初發酵：分別吸取1mL10-2、10-1的稀釋水樣和1mL原水樣，注入裝有10mL普通濃度乳糖蛋白胨試管中。另取10mL和100mL原水樣，分別注入裝有5mL和50mL三倍濃縮乳糖蛋白胨水培養基的試管和三角燒瓶中。③以下步驟同上述“自來水”的平板分離和酵試驗。所加水樣體積為100、10、1、0.1mL的發酵管結果；水樣體積為10、1、0.1、0.01mL的發酵管結果，即得每升水樣中的大腸菌群數。

濾膜過濾器裝置加水樣過濾

　濾膜過濾器裝置

加水樣過濾：過濾器漏斗內加入河水或湖水100mL，加蓋。開動真空泵進行抽濾。抽完后，加入等量的無菌水繼續抽濾，目的是沖洗漏斗壁。注意：直徑為35mm的濾膜所過濾的水量以培養后長出的菌落數不多于50個為適宜。一般清潔的深井水或經處理過的河水與湖水等可取樣300～500mL；比較清潔的河水或湖水可取樣100mL；嚴重污染的水樣可先進行稀釋；未知的水樣可做3個稀釋度，選擇菌落數合適的稀釋度進行計算。

平板培養：用無菌鑷子取濾膜邊緣，將沒有細菌的一面緊貼在遠藤氏瓊脂平板或伊紅美藍瓊脂平板上。平板倒置于37℃下培養22～24h，培養結果。注意：濾膜與培養基之間不得有氣泡。