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              酶聯(lián)ELISA試劑盒廠家常用指南「中檢維康」

              發(fā)布時(shí)間:2021-05-09 06:38  

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              ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項(xiàng)

              ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則

              1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過2%。可用水和電子天平進(jìn)行確定。但要有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
              2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
              3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
              4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
              5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
              6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
              7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
              8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用儀器的晃動(dòng)功能。


              ELISA試劑盒——會(huì)出現(xiàn)的問題及解決辦法

              標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不佳,或是平行性不好。

              a.原因:溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

              解決辦法: 請確認(rèn)溫育位置既不透光也不透風(fēng)(如抽屜內(nèi))。

              b.原因:操作時(shí)間拖太久。

              解決辦法:請?jiān)诜椒ㄊ炀毢笤龠M(jìn)行操作。

              c.原因:微孔間相互污染。

              解決辦法: 加樣品時(shí),請小心勿濺出微孔外,以免造成其它微孔的污染。

              d.原因:標(biāo)準(zhǔn)品或酶標(biāo)記物所加入的量不一致。

              解決辦法:請使用已校正過的移液槍,并確保其與吸頭之間有高度密合性。

              e.原因:添加樣品或試劑的操作方法不正確。

              解決辦法:加樣品或試劑時(shí),吸頭請勿接觸微孔。

              f.原因:洗板過程發(fā)生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進(jìn)行下一步驟)。

              解決辦法:請隨時(shí)監(jiān)控洗板過程,洗完后立即進(jìn)行下一步驟。



              ELISA試劑盒主要實(shí)驗(yàn)原理

              ·包被:抗原或者能以物理性吸附于固相載體表面,原因是蛋白質(zhì)和聚乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,吸附之后能保持抗原反應(yīng)等活性;

              ·標(biāo)記:抗原或者可通過共價(jià)鍵與酶連接成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其活性和酶的催化特點(diǎn);

              ·顯色:酶結(jié)合物與相應(yīng)包被在固相載體的抗原或者結(jié)合后,也被固定在固相載體上,加入酶的底物之后可出現(xiàn)顯色反應(yīng),根據(jù)反應(yīng)的顏色深淺可計(jì)算抗原或者的相對含量。



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