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發布時間:2021-10-01 09:02  
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武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。原位雜交技術因其高度的靈敏性和準確性而日益受到許多科研工作者的歡迎,并廣泛應用到基因定位、和基因圖譜的構建等研究領域。
雜交結束后,去除雜交液,立即于室溫把濾膜放入大體積(300-500ml)的2×SSC和0.1% SDS溶液中,輕輕振搖5分鐘,并將濾膜至少翻轉一次。重復洗 一次,同時應避免膜干涸。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火溫度下復性。
探針的標記物可以是性同位素,也可以是非性生物素和半抗原等,性同位素中,3H和35S為常用,3H標記的探針半衰期長,成像分辨率高,便于定位,缺點是能量低,35S標記探針活性較高,影像分辨率也較好,而32P能量過高,致使產生的影像模糊,不利于確定雜交位點。用于原位雜交的探針可以是單鏈或雙鏈DNA,也可以是RNA探針。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。目的探討熒光原位雜交技術(fluorescenceinsftuhybridization,FISH)在復雜染色體異常產前診斷中的應用價值。
原位雜交技術(in situ hybridization)是 以標記的核酸分子為探針,在組織細胞原位檢測特異核酸分子的技術。使含有特異序列、經過標記的核酸單鏈即探針,在適宜條件下與組織細胞中的互 補核酸單鏈即靶核酸發生雜交,再以自顯影或細胞化學方法對標記探針進行探測,從而在細胞原位顯示特異的DNA或RNA分子。可以檢測 cRNA、miRNA、LnRNA、DNA。可以各種種屬的標本,包括哺乳動物、爬行動物、菌、植物標本。也可以檢測組織芯片。武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。75ml),使菌落面朝上,將濾膜放到小洼上,展平保鮮膜,使濾膜均勻濕潤,讓濾膜留于原處2-3分鐘。
取材與標本固定
1. 取材 對于原位雜交所用的材料要盡可能新鮮,為了防止RNA的降解,取材要迅速,取材后要盡快固定或冷凍保存。
2.固定 進行原位雜交的組織或細胞必須經過固定處理,固定的目的是為了①保持細胞形態原有結構;②保存細胞內的DNA或RNA的水平;③使探針易于進入細胞或組織內。
3.固定液 常用固定液有10%甲醛、4%多聚甲醛、冰醋酸-酒精混合液、Bouin氏固定液等。這些固定液都有不同的優缺點因此要根據具體的實驗對象,選擇的固定液。
4.固定方法 組織標本取材后,迅速放入固定液中2~4h,取材組織大小為1cm×1cm×0.5cm,不宜太大。必要時,動物組織可進行灌流固定,然后將組織按要求取材放入20%蔗糖中,4℃過夜,次日可行冰凍切片。