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發(fā)布時(shí)間:2021-10-01 06:04  
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現(xiàn)有的細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)膠的應(yīng)用中會(huì)碰到哪些問題?
1)Matrigel(基質(zhì)凝膠)很難處理, 只能在低溫條件下溶解, 而且,不同批次間的產(chǎn)品在性能上、品質(zhì)上會(huì)有不同,即使來自同一個(gè)廠家也不可避免;
2)相對(duì)來說,建立的微環(huán)境并不十分穩(wěn)定, 較佳培養(yǎng)時(shí)間一般不會(huì)超過5天,且售價(jià)并不便宜;
3)重組層粘連蛋白和纖連蛋白僅適用于某些類型的細(xì)胞, 非常不穩(wěn)定且昂貴;
4)聚鳥氨酸通常與層粘連蛋白結(jié)合使用, 主要限于神經(jīng)元細(xì)胞。
問:如何使用PHENODRIVE(PHENODRIVE 作為一款人工合成的、非動(dòng)物源性的新一代細(xì)胞、組織培養(yǎng)用基質(zhì)膠(基質(zhì)凝膠)人工合成新型非動(dòng)物源性的用于細(xì)胞培養(yǎng)的基質(zhì)膠、凝膠或稱為基質(zhì)凝膠)凍干粉末?
答:在乙醇或任何水介質(zhì)中溶解, 將基質(zhì)粉末稀釋至0.01mg/mL至0.1mg/mL的濃度,在pH值7.4 的無菌緩沖溶液中, 或在75% 乙醇(用于快速涂布)中并過濾。
問:PHENODRIVE在懸浮細(xì)胞培養(yǎng)中如何使用?
答:通過對(duì)粉末重組的方式將PHENODRIVE溶解在對(duì)要培養(yǎng)的細(xì)胞類型具有特異性的無組織培養(yǎng)基中 , 將所得溶液與細(xì)胞懸液混合以達(dá)到0.001%至1%(v / v)的終濃度, 具有細(xì)胞懸液的典型混合物的變化范圍為40,000個(gè)細(xì)胞/mL至1,000,000個(gè)細(xì)胞/mL, 并在溫和的旋轉(zhuǎn)條件下于室溫或37°C孵育20分鐘照常播種細(xì)胞。這種技術(shù)已成為一種流行的方法在納米纖維的生產(chǎn)中,由于其簡(jiǎn)單、快速以及GaoXiao、低成本。
問:1mg的PHENODRIVE 粉末可以涂布多少個(gè)微孔?
答:我們的標(biāo)準(zhǔn)包裝是1mg/ 瓶, PHENODRIVE 粉末進(jìn)行重組后, 其溶液可以涂抹1塊96孔板或1塊24孔板 。
PHENODRIVE凍干粉末如何重組?
由于PHENODRIVE 是以無菌凍干粉末狀態(tài)進(jìn)行存儲(chǔ)的, 因此在使用時(shí)需要對(duì)其進(jìn)行重組。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)需求,取適量的粉末將其溶解進(jìn)水、乙醇或培養(yǎng)液中, 這個(gè)過程非常簡(jiǎn)單, 待其溶解后得到無色、透明液體經(jīng)過濾后即可準(zhǔn)備用于培養(yǎng) , 這一過程即重組。01-500毫升/小時(shí)(提供兩種操作方式即恒定流量和定量補(bǔ)充)。重組后的液體可在-20℃ 的低溫下保存3至少3個(gè)月。
重組溫度: 室溫即可;
重組環(huán)境: 推薦有紫外線照射滅菌的環(huán)境;
過濾孔徑: 0.22um;
溶液要求: 用于溶解PHENODRIVE的溶液PH值建議約7.4;
重組濃度: 建議范圍 0.01mg/ml ~0.1mg/ml, 通常濃度越高對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞表型的影響、控制時(shí)間越久, 0.01mg/ml的濃度影響、控制時(shí)間約3天, 而0.1mg/ml的則可以達(dá)到15天;