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發(fā)布時間：2021-10-23 05:05
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親和柱概述
#親和柱凈化法
親和柱凈化法是檢測真菌常用的樣品凈化方法之一，具有特異性強(qiáng)、回收率高、凈化效果好的特點，并且可以起到富集目標(biāo)化合物的作用。特別適用于真菌等微量、衡量物質(zhì)的回收測定。
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◆ 優(yōu)良的樣品凈化效果，可以經(jīng)受各種復(fù)雜樣品基質(zhì)的考驗；
◆ 穩(wěn)定而理想的回收率，滿足國標(biāo)、各類行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、藥典方法的使用要求；
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親和柱的適用范圍
親和柱，適用于基質(zhì)復(fù)雜、要求低的樣品中真菌檢測的凈化。親和柱中含有抗體，能夠結(jié)合萃取液中目標(biāo)真菌。在凈化過程中干擾物質(zhì)從柱上淋洗下來，而目標(biāo)真菌能夠固定在柱上，之后通過適當(dāng)溶劑將目標(biāo)真菌從親和柱上洗脫下來，實現(xiàn)了與雜質(zhì)的分離。
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親和柱——親和層析的分離原理
生物體中許多大分子化合物具有與其結(jié)構(gòu)相對應(yīng)的專一分子可逆結(jié)合的特性，如抗原與抗體，酶與底物或抑制，與受體等，這種結(jié)合往往是專一的而且是可逆的，生物分子間的這種結(jié)合力稱為親和力，親和層析的分離原理簡單地說就是通過將具有親和力的兩個分子中的一個固定在不溶性的基質(zhì)（也稱載體）上，利用分子間親和力的特異性和可逆性，對另一個分子進(jìn)行分離純化。被固定在基質(zhì)上的分子稱為配體，配體與基質(zhì)共價結(jié)合，構(gòu)成親和層析的固定相，稱為親和吸附劑，蛋白質(zhì)的生物特異性可以幫助選擇特異性的配體，一般是目的蛋白質(zhì)與配體結(jié)合而不吸附雜質(zhì)。蛋白質(zhì)吸附后再利用洗脫液的快速變換和加入競爭劑的方法進(jìn)行洗脫。
