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發(fā)布時(shí)間:2021-10-16 03:27  
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蛋白表達(dá)科學(xué)研究
rBPI56或其功能性氨基端片段通常在真核細(xì)胞中表達(dá),將有助于獲得具有生物學(xué)活性抗G菌重組蛋白。但因該種表達(dá)方式存在成本高、表達(dá)量低等問題而影響其實(shí)際應(yīng)用。用原核細(xì)胞表達(dá)BPI23-Fcγ1重組蛋白 。
Profinity eXact融合標(biāo)簽表達(dá)系統(tǒng):利用bio-rad rofinity eXact 系統(tǒng)制備無標(biāo)簽、N 端無任何其它殘基 的重組蛋白只需大約1 小時(shí)。該親和介質(zhì)較為穩(wěn)定,可多次用于目的蛋白的純化,從而節(jié)約了 成本。適用于純化以不溶的聚集體形式存在的重組蛋白。Profinity eXact 融合標(biāo)簽系統(tǒng)的有效性和一致性將使其成為獲得高產(chǎn)率無標(biāo)簽重組蛋白的通用平臺。
整體結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)是以氨基酸為基本單位構(gòu)成的生物高分子。蛋白質(zhì)分子上氨基酸的序列和由此形成的立體結(jié)構(gòu)構(gòu)成了蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的多樣性。蛋白質(zhì)具有一級、二級、三級、四級結(jié)構(gòu),蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)決定了它的功能。一級結(jié)構(gòu)(primary structure):氨基酸殘基在蛋白質(zhì)肽鏈中的排列順序稱為蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu),每種蛋白質(zhì)都有而確切的氨基酸序列。二級結(jié)構(gòu)(secondary structure):蛋白質(zhì)分子中肽鏈并非直鏈狀,而是按一定的規(guī)律卷曲(如α-螺旋結(jié)構(gòu))或折疊(如β-折疊結(jié)構(gòu))形成特定的空間結(jié)構(gòu),這是蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)主要依靠肽鏈中氨基酸殘基亞氨基(-NH-)上的氫原子和羰基上的氧原子之間形成的氫鍵而實(shí)現(xiàn)的。三級結(jié)構(gòu)(tertiary structure):在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上,肽鏈還按照一定的空間結(jié)構(gòu)進(jìn)一步形成更復(fù)雜的三級結(jié)構(gòu)。肌紅蛋白,血紅蛋白等正是通過這種結(jié)構(gòu)使其表面的空穴恰好容納一個(gè)血紅素分子。四級結(jié)構(gòu)(quaternary structure):具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈按一定空間排列方式結(jié)合在一起形成的聚集體結(jié)構(gòu)稱為蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)。如血紅蛋白由4個(gè)具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈構(gòu)成,其中兩個(gè)是α-鏈,另兩個(gè)是β-鏈,其四級結(jié)構(gòu)近似橢球形狀。