湖南東曹TOYOPEARL純化填料采購價格合理「慧德易科技」

小粒徑無孔單分散層析介質用于病毒的分離純化

傳統的層析介質填料都是多孔的微球，因為多孔微球材料的比表面積大，因而可以對一般生物分子分離提供較高的吸附載量。層析介質的孔徑一般都小于2000?（通常都小于100納米）。而很多病毒顆粒的粒徑一般都大于20納米，有的甚至都超過100納米。由于體積排阻的原因，病毒顆粒無法擴散進入層析介質的孔內，因而在層析吸附病毒顆粒時只有介質微球的外表面可以利用，孔內表面積由于體積排阻的原因而無法吸附病毒顆粒。然而，病毒樣品中的雜質分子一般都比病毒小，因而可以擴散進入層析介質孔內被吸附在里面。由于傳統層析介質孔內表面積遠遠大于介質微球外表面積，雜質吸附往往由于孔內表面積的存在而非常顯著，吸附洗脫時雜質含量因而較高，病毒顆粒純化效果往往不理想。無孔層析介質由于沒有大量只能容納雜質進入而病毒顆粒無法擴散進入的內孔，病毒顆粒在介質外表面的層析吸附量雖然不會有明顯變化，但樣品中的雜質被層析吸附的量會顯著減少。因此經無孔層析填料層析洗脫后，病毒樣品的分離純度顯著提高。

超大孔單分散聚合物層析介質用于病毒分離純化

傳統生物層析介質不能有效用于病毒分離純化很主要的原因是其孔徑太小，病毒不能擴散到傳統層析介質的內孔里，因此可及比表面積低，吸附載量低，而超大孔單分散層析介質由于粒徑均勻，孔徑大（>400 納米）因此病毒可以有效的擴散到孔內部空間，使得靜態吸附載量大幅度提升。超大孔結構還可以有效降低病毒與填料表面配基之間多位點結合，避免亞基的解聚，使得病毒結構穩定性得到大幅度的提高。另外超大孔聚合物層析介質用于病毒及類病毒（疫l苗）分離純化的優點是其分離模式與傳統生物制藥層析分離純化方法基本一樣，容易放大生產，重復性好。但超大孔層析介質制備技術難度大，且其機械強度差，耐壓性差，容易破碎，導致篩板堵塞，壓力升高等缺點。雖然納微已經可以制備孔徑大于高達800納米的超大孔徑聚合物微球，但要滿足病毒大規模分離純化，還需要進一步解決超大孔微球機械強度問題。

以下為納微超大孔徑DEAE離子交換層析介質在流l感病毒（H5N2）純化中的數據，結果顯示超大孔介質對流l感病毒的分離純化比傳統層析介質具有明顯的優勢。

連續色譜層析簡介

眾所周知，傳統色譜分離技術是采用固定的色譜塔進行，先進入一定量物料，然后采用洗脫劑不斷洗脫，在同一出口在不同時間段就可接到不同的產品組分，此過程明顯費時費力；而連續色譜分離技術則是利用不同物質在由固定相和流動相構成的體系中具有不同的分配系數，當兩相作相對運動時，這些物質隨流動相一起運動，并在兩相間進行反復多次的分配，從而使各物質達到分離。在實際生產中，連續流層析可獲得更高的產量，且成本更低，這是通過降低Protein A 填料用量和緩沖液消耗量實現的，由于操作穩定，其可更好地保證產品質量的一致性，并顯著提高下游純化的產量。傳統色譜分離方式通常是單一色譜柱序列上樣和洗脫，這就明顯限制了介質的利用程度，而連續色譜層析技術平行采用多根色譜柱平行上樣和洗脫，這種連續上樣的方式無疑能夠i大化介質的利用率。

層析填料的分類

在把微細分散的固體或是附著于固體表面的液體作為固定相，把液體（與上述液體不相混合的）或氣體作為移動相的系統中，使試料混合物中的各成分邊保持向兩相分布的平衡狀態邊移動，利用各成分對固定相親和力不同所引起的移動速度差，將它們彼此分離開的定性與定量分析方法，稱為層析，亦稱色譜法。根據移動相種類的不同，分為液體層析、氣體層析二種。