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發布時間:2021-07-31 20:14  
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熒光光譜
熒光分析法是指利用某些物質被紫外光照射后處于激發態,激發態分子經歷一個碰撞及發射的去激發過程所發生的能反映出該物質特性的熒光,可以進行定性或定量分析的方法。由于有些物質本身不發射熒光(或熒光很弱),這就需要把不發射熒光的物質轉化成能發射熒光的物質。例如用某些試劑(如熒光染料),使其與不發射熒光的物質生成絡合物,各種絡合物能發射熒光,再進行測定。因此熒光試劑的使用,對一些原來不發熒光的無機物質和有機物質進行熒光分析打開了大門,擴展了分析的范圍。
熒光光譜特點
靈敏度更高 g/ml,應用不如UV廣泛。應用:①直接熒光光度法②作為HPLC的檢測器(用的多)根據物質分子吸收光譜和熒光光譜能級躍遷機理,具有吸收光子能力的物質在特定波長光(如紫外光)照射下可在瞬間發射出比激發光波長長的光,即熒光。 分子受特定光照射后處于激發態的 分子返回基態時發出熒光, 其熒光強度與 呈線性關系, 從而可測出氣體濃度。當檢測儀器系統確定后,熒光總光強I與 濃度的之間的關系可表示為:I=KC在穩定的條件下,這些參數也隨之確定,k可視為常數。因此,式中I=kC表示的紫外熒光光強I與樣氣的濃度C成線性關系。這是紫外熒光法進行定量檢測的重要依據。
熒光光譜體系間跨越
是處于激發態分子的電子發生自旋反轉而使分子的多重性發生變化的過程。分子由激發單重態跨越到激發三重態后,熒光強度減弱甚至熄滅。含有重原子如碘、等的分子時,體系間跨越為常見,原因是在髙原子序數的原子中,電子的自旋與軌道運動之間的相互作用較大,有利于電子自旋反轉的發生。另外,在溶液中存在氧分子等順磁性物質也容易發生體系間跨越,從而使熒光減弱。
熒光分析的第二個特點是選擇性強,特別是對有機化合物而言。因熒光光譜既包括激發光譜又包括發射光譜,凡是能發射熒光的物質,必須首先吸收一定波長的紫外線,而吸收了紫外線后不一定就發射熒光。能發射熒光的物質,其熒光波長也不盡相同。如果即使熒光光譜相同的話,而它的激光光譜也不一定相同。反之如果它們的激發光譜相同,則可用發射光譜把它們區分開來,因此供選擇的余地是比較多的。所以熒光分析的選擇性很強。例如有兩種物質,它們的熒光光譜很相似,不易把它們分開。但它們的激光光譜不會相同,因此就可用掃描激光光譜把它們分開。如果用分光光譜法就難以辦到這一點,因為分光光譜只能得到待測物質的特征吸收光譜。所以分光光譜法的選擇性就沒有熒光分析法強。