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發布時間:2021-06-19 06:50  
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RCCS?的原理和優勢
相比動態和靜態組織培養系統,RCCS的主要優勢是其能提供理想的環境,從而允許細胞聚集、3維生長和分化。這個優勢使得我們的培養環境非常接近于體內。
在大多數的動態培養系統中細胞/組織會受損,這主要是其與推進器接觸而致。那么它為何會與推進器接觸呢?因為懸浮,那懸浮是如何產生的?這歸因于以下2個力:
1.受到推進器產生的力;
2.在培養的氧交換和懸浮過程中噴出的氣泡所產生的 剪切力。
在靜態的平面培養瓶/培養皿中,2維的環境和塑料基質會改變基因表達和阻止分化。 相比之下,在RCCS?中生長的細胞/組織因隨機變化的重力矢量而懸浮,從而在培養液中成連續的自由落體狀態。一個較好的比喻是:細胞從無限高的充滿液體的管中落下。組織在培養液中會落下、翻滾和混合,受不到任何主宰生長方向的單個重力矢量的影響;組織會向各個方向生長。這就是RCCS?的機制。
由于系統無推進器、空氣升液器、氣泡或攪拌器,使破壞性應力減到1小。因維持在一個理想的流體軌道中,故細胞能共同生長、互相交流和形成3維的結構。
此外,RCCS?是目前唯1的能使研究者進行共同培養,而這種培養能提供本能的分化、高細胞增殖、低的細胞率和增加細胞產物的分泌。
RCCS-3D三維細胞培養中原代細胞的分離方法?
凡是來源于胚胎、組織器1官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。1懸浮細胞的分離方法組織材料若來自血液、羊水、胸水或的懸液材料,簡單的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據需要收獲目的細胞。2實體組織材料的分離方法對于實體組織材料,由于細胞間結合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。
RCCS-3D系統中細胞分化和3D結構
RCCS-3D具有的低剪切力可以促進細胞緊密附著,促進細胞間聯系,通過特異性的細胞粘附分子促進細胞分化,保持高密度細胞培養的能力;可以直接影響基因表達,或者間接促進細胞間信號的旁分泌自主分泌。這一過程可使聚集不被剪切力破壞而快速建立和增大。模擬微重力環境可以促進從多種正常的和轉化細胞構建肉眼可見的、分化的、組織樣3D 結構(即組織等同物或類器X官),研究范圍包括病毒、人腫X瘤細胞和其它生物制品(如抗X體、抗原)。