PCR實驗室建設擇優推薦「多圖」

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在前PCR區建立PCR混合物：

⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分裝并保存在-20℃或4℃，在實驗室只涉及到擴增一種或少數幾種特異序列時這樣做很有用。

⑵如果你的實驗室使用多套引物，以致于配制包括所有試劑的單一反應混合物不夠經濟，可以考慮分裝保存夠一天的PCR成分。

⑶作為一個規則，應該保存一套陰性、弱陽性和強陽性對照樣品來分析樣品配制和PCR前過程的效率和潔凈程度。而且，你也希望通過使用一個已知的弱陽性樣品來驗證你的樣品緩沖液以證明里面不含擴增抑制物。

⑷陰性樣品要與每組樣品同時做，以分析是否存在樣品與樣品之間的污染以及是否存在PCR產物的污染，陰性對照應該包括核酸以外的所有試劑。

⑸當做陽性對照時，有兩個理由決定了應該使用很少數量的核酸。

⑹由于必須有對照反應，對照模板的特點應該予以考慮。

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PCR實驗室污染的預防與控制

PCR實驗室設計的核心問題是如何避免污染。在實際工作中，常見的有以下幾種污染類型：擴增產物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標本間的污染。由于一旦發生污染，實驗就必須停止，直到找到污染源為止，而且實驗結果必須作廢，需重新進行實驗。所以發生污染后再圍繞實驗室來尋找污染源不但耗時而且繁瑣，浪費人力物力。因此要避免污染，首先應是預防，而不是排除。

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PCR實驗室為負壓實驗室，無潔凈度要求；

1、PCR 實驗室依據所使用的方法可分為試劑準備、標本制備、擴增、產物分析等三或四個區域。只是使用實時熒光PCR儀、HIV病毒載量測定儀的PCR實驗室，有上述前面三個區域即可。各區域應完全獨立分隔，不應有任何的空氣直通。

2、標準的PCR實驗室產物分析區或三個區域的后一個區域（即擴增及產物分析區），空氣流向應由室外向室內，可通過在室內設置通風櫥、排風扇或其他排風系統達到空氣流由室外向室內流動的要求。