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等溫核酸試劑盒

核酸試劑盒的原理

核酸檢測，其實就是通過檢測熒光信號的累積來確定樣本中是否有病毒核酸。現在核酸檢測試劑盒（多重熒光RT-PCR法），能夠實現一小時快速精準診斷。

根據銳科技發布的文章《如何進行核酸檢測帶你揭秘全過程》，目前的病毒核酸檢測試劑盒，多數采用熒光定量PCR方法。檢測原理是以病毒獨特的基因序列為檢測靶標，通過PCR擴增，使我們的選擇這段靶標DNA序列指數級增加，每一個擴增出來的DNA序列，都可與我們預先加入的一段熒光標記探針結合，產生熒光信號，擴增出來的靶基因越多，累計的熒光信號就越強。

核酸試劑盒

樣本采集質控重要性

樣本采集作為核酸檢測的首步，其中涉及的采樣耗材和病毒保存液的質量保證對檢測結果的準確性至關重要，不合格樣本會直接影響檢驗結果。在新冠核酸檢測中，不合格樣本通常是由于采樣問題和采樣用具問題導致的。

合格的病毒保存液目前主要要求兩點：

1.保證病毒的充分滅活，防止采樣、運輸和檢測過程的風險。

2.保證病毒核酸（RNA）在采集、運輸過程中的穩定性，保證檢測結果的準確性，防止樣本運輸保存過程中降解導致檢測的“假陰性”。

試劑盒

英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification，RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術，目前全球新的等溫擴增檢測技術。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品，能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低，特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物防御和農業等領域。常規PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟，而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的適宜溫度在37°C - 42°C之間，無需變性，在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外，由于不需要溫控設備，RPA可以真正實現便攜式的快速核酸檢測。據介紹，RPA檢測的靈敏度很高，能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平，從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理，適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產物進行終點檢測，還可以對擴增過程進行實時監控，甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。

目前，TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內。不過，經過特別優化的RPA擴增，也可以生成更長的擴增產物，或者減慢擴增速度(便于定量)，甚至在更低的溫度下進行反應。