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發布時間:2021-03-20 10:16  
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武漢遠大弘元股份有限公司以氨基酸及其衍生物的研發、生產為基礎,以武漢大學生命科學學院和湖北省氨基酸工程技術研究中心的成果為依托,為客戶提供的產品。
天津工業生物技術研究所研究員劉君帶領的微生物生理和代謝工程研究組和研究員江會鋒帶領的新酶設計與酵母基因組工程研究組進行合作,通過結合代謝工程和蛋白質工程的方法,系統地改造大腸桿0菌,實現了OAH的合成。在研究中,首先比較了兩種不同來源的高絲氨酸乙酰轉移酶(MetX),然后通過敲除競爭和消耗途徑基因(meta,metB和thrB)并過表達合成途徑基因(thrA,metxlm),實現了OAH的積累,其產量達到1.68 g/L。為了進一步提高OAH的生產,該研究采用多種代謝工程策略對工程菌株進行進一步改造,包括:敲除賴氨酸競爭途徑基因lysA;利用啟動子工程調控ppc表達以增強草酰乙0酸的供給;(3)ScoLeuRS識別兩類ScotRNALeu的不同處在于tRNA三級結構拐肘結構的三個堿基對,II類ScotRNALeu(UAA)的三對三級結構堿基對對它的氨基酰化極為重要,而I類ScotRNALeu(CAA)中的這三個堿基對并不重要。比較不同來源的天冬氨酸激酶,促進前體天冬氨酸的合成等,使OAH的產量提高至4.69 g/L。然而,中間代謝產物高絲氨酸的大量積累說明其下游途徑關鍵酶MetXlm的催化能力是不足的。為了解決這一問題,該研究分別采用基于進化保守性和基于結構信息的蛋白質工程策略對MetXlm進行改造,獲得的突變體酶活比型提高了12.15倍并受到更少的反饋抑制。通過優化表達MetXlm突變體,使工程菌株OAH產量達到7.37 g/L。隨后該研究通過過表達胞內乙酰CoA合成途徑,調控胞內NADPH的合成,進一步提高OAH的合成能力。終獲得的工程菌株OAH-7在7.5 L發酵罐中經60 h發酵能夠生產62.7 g/L的OAH,是目前報道的0高水平。
可以從雞蛋和牛奶等乳制品獲得L-半胱氨酸。凝乳和干酪等產品也是良好的來源。純酸奶和乳清蛋白產品還提供一種自然形式半胱氨酸。洋蔥,大蒜,西蘭花是含半胱氨酸的其中一部分蔬菜,是提升體內半胱氨酸水平的良好來源。
L-半胱氨酸是一種具有生理功能的氨基酸,是組成蛋白質的20多種氨基酸中惟一具有還原性基團巰基(-SH)的氨基酸,現今已在、食品添加劑和化妝品中廣泛應用。2002年全世界對半胱氨酸的需求達到4400-4600噸,而且以每年2-3%速度遞增。一,而S()j一可還原為某種硫化物,這正是發酵法制取L-半胱氨酸難以解決的問題。