原位雜交技術電話 思特進

原位雜交是指將特定標記的已知順序核酸為探針與細胞或組織切片中核酸進行雜交，從而對特定核酸順序進行精3確定量定位的過程。原位雜交可以在細胞標本或組織標本上進行。

原位雜交技術(In situ hybridization，ISH)是分子生物學、組織化學及細胞學相結合而產生的一門新興技術，始于20世紀60年代。

原位PCR；原位雜交細胞定位和PCR的高靈敏度相結合的技術，在細胞（爬片、甩片或涂片）或組織（石蠟、冰凍切片）上直接對靶基因片段進行擴增，通過摻入標記基團直接顯色或結合原位雜交進行檢測的方法。

間接標記的方法中應用了報告分子標記的探針，報告分子通過親和酶促的方法進行顯色。常用的報告分子如地高6辛，生物素。結合地高6辛抗6體或鏈霉親和素上耦聯的酶系統進行間接的底物反應檢測。地高6辛標記核酸的歷史可追溯到1987年，由于地高6辛是洋地黃的花和葉中特有的成分，檢測時使用的地高6辛抗6體不會結合于其他的生物分子。這是相較于生物素標記系統的優勢。地高6辛抗6體上可耦聯堿性磷酸酶、過氧化酶，及熒光分子和膠體金等，根據不同的應用需求，呈現高信噪比的核酸檢測結果。但需注意，由于引入了免6疫檢測反應，在放大檢測靈敏度的同時，應注意樣品內源性酶的滅活，以降低檢測背景。

通過不同標記方法的聯合應用，還可在同一樣本中實現染色體不同區域或細胞樣本中不同RNA序列的多重檢測。

顯色原位雜交 (CISH)

顯色原位雜交 (CISH) 能讓您利用組織學實驗室中已經存在的方法在組織形態學背景下獲取遺傳信息。 我們提供用于CISH分析的CISH DNA探針和關鍵試劑。

熒光原位雜交 (FISH)

多重熒光原位雜交 (FISH) 能讓您利用單一樣本同時檢測多個靶標并直觀顯示共定位情況。 使用不同光譜的熒光基團標記每種不同的雜交探針，這種方法能讓您在單一樣本中解析多種遺傳成分或多基因表達模式，并提供多色直觀顯示。

總的來說，隨探針濃度增加，雜交率也增加。另外，在較窄的范圍內，隨探針濃度增加，敏感性增加。依我們的經驗，要獲得較滿意的敏感性，膜雜交中32P標記探針與非放0射性標記探針的用量分別為5～10 ng/ml和25～1000ng/ml，而原位雜交中，無論應用何種標記探針，其用量均為0.5～5.0μg/ml。探針的任何內在物理特性均不影響其使用濃度，但受不同類型標記物的固相支持物的非特異結合特性的影響。