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              河北低溫生物菌種價格常用解決方案,開碧源有限公司

              發布時間:2020-11-07 08:30  

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                                                                    低溫生物菌種的保藏法你了解多少?

              保藏可按微生物各分支學科的專業性質分為普通﹑工業﹑農業﹑醫學﹑獸醫﹑等保藏管理中心。此外﹐也可按微生物類群進行分工﹐如沙門氏菌﹑弧菌﹑根瘤菌﹑乳酸菌﹑酵母菌﹑絲狀真菌﹑藻類等保藏中心。

              世界上約有 550個菌種保藏機構。其中有美國典型菌種保藏中心(簡稱ATCC﹐馬里蘭)﹕1925年建立﹐是世界上大的﹑保存微生物種類和數量多的機構﹐保存病毒﹑衣原體﹑細菌﹑酵母菌﹑真菌﹑藻類﹑原生動物等約 29000株﹐都是典型株﹔荷蘭真菌菌種保藏中心(簡稱CBS﹐得福特):1904年建立﹐保存酵母菌﹑絲狀真菌約 8400種﹑18000株﹐大多是模式株﹔英國全國菌種保藏中心(簡稱NCTC﹐倫敦)﹕保存獸用病原微生物約2740株﹔英聯邦真菌研究所(簡稱CMI﹐薩里郡)﹕保存真菌模式株﹑生理生化和有機合成等菌種2763種﹐8000株﹔日本大阪發酵研究所(簡稱IFO﹐大阪):保存普通和工業微生物菌種約9000株﹔美國相關部北方利用研究開發部(北方地區研究室﹐簡稱NRRL﹐伊利諾伊州皮契里亞)﹕收藏農業﹑工業﹑微生物分類學所涉及的菌種﹐包括細菌5000株﹐絲狀真菌1700株﹑酵母菌6000。





                                                                          低溫生物菌種的脫水存法

              ①沙土保存法,能產孢子的細菌、線菌及霉菌可采用此法保存,即將沙和土以3:2比例混合,經稀酸處理洗凈過篩,裝入小試管內,裝置高度為1cm;滅菌2~3次,烘干后即可將在斜面培養基上生長良好的孢子,用無菌蒸餾水2~2.5ml制成孢子懸液,吸取少許加入沙土管中,經真空抽干,外觀呈松散狀態,于4℃冰箱保存,保存期可達5~7年。
              ② 冷凍干燥法,將孢子懸浮液與保護劑(一般用脫脂牛奶)相混合,放在安瓿管內于-20~-30℃的乙醇浴中速凍。然后,在低溫下用真空泵抽干,并用干冰使水汽結凍,熔封安瓿管,于低溫下保存。保存期可達5~10年之久。

              ③ 石蠟油封存法,在斜面菌種培養物上,倒上滅菌后的石蠟油,高出斜面1cm,于4℃冰箱或低溫干燥處保存,此法不適用于能利用石蠟油作碳源的微生物,保存期為一年以上。






                                                                         低溫生物菌種的控溫方法

              1.程序控溫降溫法,應用電子計算機程序控制降溫裝置,可以穩定連續降溫,能很好地控制降溫速率。

              2.分段降溫法:將菌體在不同溫級的冰箱或液氮罐口分段降溫冷卻,或懸掛于冰的氣霧中逐漸降溫。一般采用二步控溫,將安瓿管或塑料小管,先放-20℃至-40℃冰箱中1-2小時,然后取出放入液氮罐中快速冷凍。這樣冷凍速率大約每分鐘下降1-1.5℃。 對耐低溫的微生物、可以直接放入氣相或液相氮中。
              3.保藏
              將安瓿管或塑料凍存管置于液氮罐中保藏。一般氣相中溫度為-150℃,液相中溫度為-196℃。保藏周期一般10年以上。
              4.復蘇方法

              從液氮罐中取出安瓿管或塑料凍存管,應立即放置在38℃-40℃水浴中快速復蘇并適當搖動。直到內部結冰全部溶解為止,一般約需50秒-100秒。開啟安瓿管或塑料凍存管,將內容物移至適宜的培養基上進行培養。




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