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發布時間:2021-01-10 19:41  
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三羥英文簡稱為Tris,英文名為2-Hydroxymethyl-2-nitro-1,3-propanediol,是一種重要的生物化學、化學和。Tris是常見的生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液成分和滴定標準物,作為可有效地急性肺損傷患者酸,誘導磷脂雙層膜形成波紋結構的單層膜。同時還被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,以及其他多種重要用途。
工業合成:三羥本身由于結構簡單,以中心碳原子呈四面體結構,含三個羥和一個氨基,可以進行多種取代和氧化還原反應,是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內酯在醇中合成的。通常要采購用于工業合成的Tris原料對試劑純度要求不高,重點是量大,找產能較大的原料生產廠家是比較劃算的。
蛋白制備及純化過程中緩沖液的選擇非常重要,合適緩沖液才能保證蛋白的活性和結構穩定。
當我們純化蛋白時,的就是要保持蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量降低純化過程對蛋白活性帶來的損失。這就意味著蛋白在整個純化過程中要始終保持可溶性和活性。
因此設計一個防止蛋解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了,尤其會凸顯在實驗結果上。在設計緩沖buffer時應考慮以下幾個因素:pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩定劑。其中每一個因素都要根據你的目的蛋白進行優化,并以目的蛋白的活性作為優化的評估標準。
8mol/L乙酸鉀(potassium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L(KCl):溶解7.46g于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽?;蚍Q取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。