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發布時間:2021-06-07 08:49  
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廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。c18固相萃取柱供應商
固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱 SPE)是一種以液-固色譜分離為基礎的前處理技術,可對目標化合物進行選擇性吸附和選擇性洗脫。按保留機理,力主要分為無極力作用、極力作用、離子交換(靜電吸引)。
反相態是 SPE小柱中相對于流動相極性較低的分離態。本發明主要利用固定相官能團的碳氫鍵和目標化合物的碳氫鍵之間的非極性作用力,適合從極性基質中提取分離非極性和中極性的目標物。
對由非極性力吸附到反相 SPE柱上的目標物,可用弱極性溶劑,如氯1仿、環己1烷、乙1酸乙1酯等洗脫。只有當溶劑的洗脫強度足夠大時,才能使目標物與吸附劑之間的范德華力破壞,使目標物從 SPE柱洗脫。即使是極性更強的甲1醇,對許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候,單種溶劑無法徹底洗脫疏水性強的目標物,可以考慮使用二1氯甲1烷:乙1酸乙1酯(1:1,體積比)。
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正相填充(Silica,NH2, CN, Florisil, Diol, Carb,Alumina-N, A, B)
*分析物:中等極性至強極性
*基質:從非極性到中極性
·方法:
(a)激1活:非極性有機溶1劑(通常由上樣液所在的有機溶1劑激1活)
(b)洗脫:非極性有機溶1劑(一般是上樣液所在的有機溶1劑)
在選擇C18反相分離柱時,應根據樣品情況,改變流動相的組成或溶劑強度,以提高分離度、選擇性或保留時間。
反相法C18在分離過程中,水可以與水-甲1醇、水-乙1腈、水-四氫呋1喃等多種有機溶1劑混合,而且分離效果也很好。適當的改良劑,如三乙1胺或乙1酸,可抑制硅膠表面殘余硅羥基的酸性,從而減少對酸或堿性組分的保留,并減少拖尾;同時,對流動相 PH值的調節,可大大改變酸性或堿性組分的選擇性。對酸性組分,流動相 PH<7時,增加色譜柱的保留時間;對堿性樣品,流動相 PH≥7時,將堿性組分分為游離型(RNH2),極性小,保留時間增大,可在固定相和流動相之間多次分布,提高堿性組分的選擇性。
回收率
當一個完整的 SPE操作過程中,目標化合物可能會出現在出液、淋洗、洗脫液或吸附劑中,當“目標物不能回收或回收率低”現象出現時,則向樣品溶液中加入標液,然后進行一個完整的 SPE操作,分別收集出液、淋洗液和洗脫液并進行分析。
先確定目標化合物存在于哪個部分,然后確定問題來自以下哪個環節:目標化合物不能保留在吸附劑中;沒有完全洗脫;其他環節。
目標化合物在吸附劑中保留度不足
在樣品流出液或淋洗液中發現5%以上的目標化合物時,可得出“不能保留目標化合物在吸附劑中”的結論。
2.目標化合物未完全洗脫
在樣本溶液流出液和淋洗液中沒有出現目標化合物,而在洗脫液中只出現少量或不出現目標化合物,則判斷為“目標物未完全洗脫”
廣州碩譜生物科技有限公司,反相SPE柱,是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。c18固相萃取柱供應商
SPE小柱相極固定比流動相極性大的分離模式稱為正相模式。主要用途:
固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用;極性力比非極性力強,但比離子力弱;常用的極性基團有羥基,胺基,巰基等。弱極化基質環境有利于形成極性力,因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結果表明: SPE正相萃取后,樣品基質多為弱極性,如正己烷、二氯甲i烷、菜油等,而目標物多含有極性官能團。常用極性固定相包括:硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。
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GP-C18通用反相色譜柱特點:
利用高可控性的單分子層形成技術和封尾技術
*柱間重現率高
*選擇性和分離效i率高
適宜于分離酸性i、中性和堿性化合物,以及多種藥i物和多肽等
建議使用有i機溶劑或有i機溶劑/水系統的流動相。