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              發(fā)布時(shí)間:2021-09-12 19:15  

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              然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結(jié)合物,經(jīng)第二次孵育后,酶結(jié)合物就會(huì)與次孵育結(jié)合上的HEV IgM相結(jié)合,洗板除去未結(jié)合的酶結(jié)合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時(shí)會(huì)發(fā)生酶-底物反應(yīng),只有那些含有HEV IgM和酶結(jié)合物所形成的復(fù)合物的孔才會(huì)發(fā)生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應(yīng)



              制備方法編輯包括以下步驟:1)抗原表位的計(jì)算機(jī)篩選;2)抗原的制備;3)的采集;4)間接ELISA方法的建立;5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證;6)試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證;7)對(duì)屠宰場進(jìn)行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強(qiáng)、穩(wěn)定性合格、重復(fù)性好。應(yīng)用本發(fā)明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒,適用于大批量發(fā)病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預(yù)防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



              終止液(3M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)  24.3ml加蒸餾水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)  10ml0.75%H2O2   32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物緩沖液(PH5.5)  1ml3%H2O2   2μl(8) 抗原、和酶標(biāo)記。(9) 正常人和陽性對(duì)照。



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