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              發布時間:2021-09-12 19:15  

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              然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過氧化物酶)酶結合物,經第二次孵育后,酶結合物就會與次孵育結合上的HEV IgM相結合,洗板除去未結合的酶結合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育時會發生酶-底物反應,只有那些含有HEV IgM和酶結合物所形成的復合物的孔才會發生顏色變化,加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應



              制備方法編輯包括以下步驟:1)抗原表位的計算機篩選;2)抗原的制備;3)的采集;4)間接ELISA方法的建立;5)間接ELISA方法的敏感性和特異性驗證;6)試劑盒的穩定性驗證;7)對屠宰場進行臨床檢測。該方法簡單、快速、靈敏度高、特異性強、穩定性合格、重復性好。應用本發明制得的試劑盒能有效檢出豬的戊型病毒,適用于大批量發病樣本的檢測,可用于豬戊肝的快速診斷,并預防、控制豬戊毒的流行和阻斷戊毒由豬向人傳播。



              終止液(3M H2SO4):蒸餾水178.3ml,逐滴加入(98%)21.7ml。(5) 底物緩沖液(PH5.0磷酸棗檸檬酸):0.2MNa2HPO4(28.4克/L)25.7ml0.1M檸檬酸(19.2克/L)  24.3ml加蒸餾水50ml。(6) TMB(四)使用液:TMB(10mg/5ml無水乙醇)0.5ml底物緩沖液(PH5.5)  10ml0.75%H2O2   32μl(7) ABTS使用液:ABTS 0.5mg底物緩沖液(PH5.5)  1ml3%H2O2   2μl(8) 抗原、和酶標記。(9) 正常人和陽性對照。