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發(fā)布時(shí)間：2021-01-04 21:18
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Tris本身呈堿性，只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液，方法也較為簡單，而且還可以與其他物質(zhì)組成多種緩沖體系；對生物化學(xué)過程干擾很小，也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。但是，Tris緩沖液的pH值受溶液濃度和溫度影響較大，稀釋十倍，緩沖液的pH值變化大于0.1，溫度每升高一度，pH值下降0.03；同時(shí)其易吸收空氣中的CO2，所以配制的緩沖液要蓋嚴(yán)密封。
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質(zhì)的溶劑，還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質(zhì)晶體生長。Tris緩沖液的低離子強(qiáng)度特點(diǎn)可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質(zhì)電泳緩沖液的主要成分之一，其在電泳緩沖液中與甘氨酸構(gòu)成緩沖體系，穩(wěn)定電泳過程中的PH。Tris還是制備表面活性劑、硫化促進(jìn)劑和一些的中間物。Tris也被用作滴定標(biāo)準(zhǔn)物。 作為蛋白緩沖液時(shí)，若后續(xù)工作需要質(zhì)譜，則不適宜用Tris，換成其他質(zhì)譜儀可耐受的緩沖液。
很多實(shí)驗(yàn)的pH值設(shè)定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個(gè)pH值下是穩(wěn)定的，那就非常棒了！如果不是，就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會(huì)降解的狀態(tài)。
一個(gè)經(jīng)驗(yàn)法則是：蛋白在它等電點(diǎn)pI附近的pH值溶液中會(huì)表現(xiàn)得不易溶解，因?yàn)榈鞍自谄涞入婞c(diǎn)的pH值溶液中表面沒有凈電荷，從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計(jì)算蛋白等電點(diǎn)pI值，只要提交蛋白序列即可。
