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發布時間:2021-01-04 21:18  
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Tris本身呈堿性,只用Tris-HCl緩沖體系即可配制pH范圍由酸性到堿性的緩沖液,方法也較為簡單,而且還可以與其他物質組成多種緩沖體系;對生物化學過程干擾很小,也不與鈣、鎂離子及重金屬離子發生沉淀。但是,Tris緩沖液的pH值受溶液濃度和溫度影響較大,稀釋十倍,緩沖液的pH值變化大于0.1,溫度每升高一度,pH值下降0.03;同時其易吸收空氣中的CO2,所以配制的緩沖液要蓋嚴密封。
Tris緩沖液不僅被廣泛用作核酸和蛋白質的溶劑,還有許多重要用途。Tris被用于不同pH條件下的蛋白質晶體生長。Tris緩沖液的低離子強度特點可用于線蟲核纖層蛋白的中間纖維的形成。Tris也是蛋白質電泳緩沖液的主要成分之一,其在電泳緩沖液中與甘氨酸構成緩沖體系,穩定電泳過程中的PH。Tris還是制備表面活性劑、硫化促進劑和一些的中間物。Tris也被用作滴定標準物。 作為蛋白緩沖液時,若后續工作需要質譜,則不適宜用Tris,換成其他質譜儀可耐受的緩沖液。
很多實驗的pH值設定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個pH值下是穩定的,那就非常棒了!如果不是,就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會降解的狀態。
一個經驗法則是:蛋白在它等電點pI附近的pH值溶液中會表現得不易溶解,因為蛋白在其等電點的pH值溶液中表面沒有凈電荷,從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計算蛋白等電點pI值,只要提交蛋白序列即可。