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              發布時間:2021-06-22 06:59  

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              {微生物}培養



              ——微生物培養——

              指將微生物接種到培養基內,經一定條件使微生物生長繁殖。接種的方法有 6種。①涂布法:將純菌或含菌材料均勻地涂布在固體培養基表面。②劃線法:用接種環沾取含菌材料,在固體培養基表面劃線。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養基,搖勻后冷卻凝固。④點植法:用接種針在固體培養基表面接觸幾點。⑤穿刺法:用接種針沾取的微生物經穿刺而進入半固體深層培養基中。⑥浸洗法:用接種針挑取含菌材料,在液體培養基中洗下。培養方法則根據微生物對氧的要求情況分為需氧和厭氧兩種。需氧培養是指必須在有氧環境中進行培養,必要時用振蕩或通氣攪拌達到充分供氧;厭氧培養是培養過程一直保持在少氧或無氧的環境中。厭氧的方法可用物理、化學、生物等辦法使培養容器內的氧氣部分或全部消除。通常用抽真空方法,有時將兩種方法結合使用,使厭氧培養更為理想。——食品微生物項目背景——食源病原微生物引起的食源性疾病是食品安全的核心問題。接種、培養是食品微生物應用、研究過程中基本和必不可少的方法。


              {微生物檢測}微生物接種





              將微生物接到適于它生長繁殖的人工培養基上或活的生物體內的過程叫做接種。

              接種和分離工具

              1.接種針 2.接種環 3.接種鉤 4.5.玻璃涂棒 6.接種圈 7.接種鋤 8.小解剖刀

              常用的接種方法有以下幾種:

              1、劃線接種

              這是zui常用的接種方法。即在固體培養基表面作來回直線形的移動,就可達到接種的作用。常用的接種工具有接種環,接種針等。在斜面接種和平板劃線中就常用此法。

              2、三點接種

              在研究霉菌形態時常用此法。此法即把少量的微生物接種在平板表面上,成等邊三角形的三點,讓它各自獨立形成菌落后,來觀察、研究它們的形態。除三點外,也有一點或多點進行接種的。

              3、穿刺接種

              在保藏yanyang junzhong或研究微生物的動力時常采用此法。做穿刺接種時,用的接種工具是接種針。用的培養基一般是半固體培養基。③傾注法:取少許含菌材料放入無菌培養皿中,然后傾入已融化并已冷卻至48℃左右的瓊脂滅菌培養基,搖勻后冷卻凝固。它的做法是:用接種針蘸取少量的junzhong,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。

              穿刺接種的兩種方法:垂直法和水平法



              抑菌效力

              接種大腸埃希菌、金黃色球菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養物至胰酪胨大豆肉湯培養基中,30~35℃培養18~24小時;接種白色的新鮮培養物至沙氏葡萄糖液體培養基中,20~25℃培養24~48小時。上述培養物用0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含菌數為50~100cfu的菌懸液。接種黑曲霉的新鮮培養物至沙氏葡萄糖瓊脂斜面培養基中,20~25℃培養5~7天,加入3~5ml含0.05%(ml/ml)聚山梨酯80的0.9%無菌氯化鈉溶液,將孢子洗脫。它的做法是:用接種針蘸取少量的junzhong,沿半固體培養基中心向管底作直線穿刺,如某細菌具有鞭毛而能運動,則在穿刺線周圍能夠生長。然后,采用適宜方法吸出孢子懸液至無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數50~100cfu的孢子懸液。





              抑菌效力-培養基


              培養基的制備

              1.胰酪大豆胨液體培養基

               胰酪胨17.0克

              氯化鈉5.0克

              大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克

              磷酸氫二鉀2.5克

              葡萄糖(一水合)2.5克

              水1000mL

              除葡萄糖外,取上述成分,混合,微溫溶解,濾過,調節 pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入葡萄糖,分裝,滅菌。

              胰酪大豆胨液體培養基置 20~25℃培養。

              2. 胰酪大豆胨瓊脂培養基

              胰酪胨15.0克

              大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克

              瓊脂15.0克

              水1000ml

              除瓊脂外,取上述成分,混合。微溫溶解,調節 pH 值使滅菌后在 25℃的 pH 值為 7.3±0.2,加入瓊脂,加熱溶化后,搖勻,分裝,滅菌。

              3.沙氏葡萄糖液體培養基

              沙氏葡萄糖瓊脂培養基照微生物限度檢查法(附錄ⅩⅢ C)制備。




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