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發布時間:2021-01-08 23:58  
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低溫生物菌種怎么保藏
菌種保藏(culture preservation,culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遺傳性狀的技術。或經人工選育得到的變異型純種,使其存活、不丟失、不污染雜菌、不發生或少發生變異,保持菌種原有的各種特征和生理活性。基本原理是使微生物的生命活動處于休眠狀態,也就是使微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內。干燥、低溫和隔絕空氣是保證獲得這種狀態的主要措施。有針對性地創造干燥、低溫和隔絕空氣的外界條件,就是微生物菌種保藏的基本技術。常用的方法有凍干保藏法、深低溫保藏法、液氮保藏法、礦油封藏法、固體曲保藏法、砂土管保藏法、瓊脂穿刺保藏法等。日常工作中,常選用4℃冰箱進行短時間的菌種保藏
低溫生物菌種知多少?
實驗室菌種的傳代保藏過程
1. 按菌種說明書要求復溶菌粉,轉種于適當的增菌培養基內(G1),復壯后轉接至平板上,并于適當溫度下培養適當時間,分離出單個純種菌落,此為第2代(G2)。
2. 菌種鑒定完成后,挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管,同時挑取純菌落轉接斜面菌種作為工作用菌種。此時,保藏菌種為第2代,但工作用菌種則為第三代。
3. 將第2代菌種管冷凍保存,將工作用菌種于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。
4. 取一支冷凍保存的G2代菌種轉種于平板和斜面培養基上,平板上的菌種制成冷凍保藏管第三代(G3),斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用菌種(W3)。
5. 將第三代菌種(G3)冷凍或低溫保存,將生長、轉種后的G2菌種經滅菌處理后丟棄。
6. 當工作用菌種代數小于5時,可直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種,如W3可直接轉接為W4。
7. 按上述程序操作,直至G4轉為W5為止,需重新開啟安瓿,再重復上述操作程序、保藏和使用菌種。
以上方法中,菌種被分為兩類。傳代用菌種和工作用菌種,傳代用菌種用于甘油冷凍管法保藏,工作用菌種用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明,甘油冷凍管的有效期至少為2年,但其主要適用于細菌(需氧)、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。
低溫生物菌種的保藏法你了解多少?
保藏可按微生物各分支學科的專業性質分為普通﹑工業﹑農業﹑醫學﹑獸醫﹑等保藏管理中心。此外﹐也可按微生物類群進行分工﹐如沙門氏菌﹑弧菌﹑根瘤菌﹑乳酸菌﹑酵母菌﹑絲狀真菌﹑藻類等保藏中心。
世界上約有 550個菌種保藏機構。其中有美國典型菌種保藏中心(簡稱ATCC﹐馬里蘭)﹕1925年建立﹐是世界上大的﹑保存微生物種類和數量多的機構﹐保存病毒﹑衣原體﹑細菌﹑酵母菌﹑真菌﹑藻類﹑原生動物等約 29000株﹐都是典型株﹔荷蘭真菌菌種保藏中心(簡稱CBS﹐得福特):1904年建立﹐保存酵母菌﹑絲狀真菌約 8400種﹑18000株﹐大多是模式株﹔英國全國菌種保藏中心(簡稱NCTC﹐倫敦)﹕保存獸用病原微生物約2740株﹔英聯邦真菌研究所(簡稱CMI﹐薩里郡)﹕保存真菌模式株﹑生理生化和有機合成等菌種2763種﹐8000株﹔日本大阪發酵研究所(簡稱IFO﹐大阪):保存普通和工業微生物菌種約9000株﹔美國相關部北方利用研究開發部(北方地區研究室﹐簡稱NRRL﹐伊利諾伊州皮契里亞)﹕收藏農業﹑工業﹑微生物分類學所涉及的菌種﹐包括細菌5000株﹐絲狀真菌1700株﹑酵母菌6000。