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              洋蔥亞細胞定位培養電話「在線咨詢」

              發布時間:2021-01-13 11:23  

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              武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;本研究中,我們了這兩個EST片段所代表的基因,StRFP和StPUB,并研究了其生物學功能。可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。




              亞細胞定位是指某種蛋白或表達產物在細胞內的具體存在部位。例如在核內、胞質內或者細胞膜上存在。GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會發出綠色熒光,從而可以地定位蛋白質的位置。


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              存植物基因工程育種中,與導入一個功能基因相比,導入一個關鍵的調控基因的改良效果更好。而基因的表達調控是在多級水平上參加的復雜事件,其中轉錄起始是基因表達的的調節環節,翻譯以及翻譯后加工是基因表達的基本控制點。囚此本研究以剛毛檉柳(Tamarix hispida)的轉錄因子ThDREB和翻譯起始因子TheIFIA兩個基因為研究對象,對基因的表達和功能進行了初步研究,以期為抗逆基因工程育種提供理論依據和基因材料。由于其編碼蛋白的N-端具有高度保守的WRKYGQK氨基酸殘基序列,人們將其命名為WRKY。


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              胞質Ca~(2 )是重要的第二信使,通過Ca~(2 )結合蛋白產生磷酸化信號級聯,調控下游基因表達。鈣依賴而鈣調素不依賴的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentprotein kinases,CDPKs)是一類僅在植物和部分原生生物中存在的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,在鈣信號轉導中具有重要功能。越來越多的證據表明,CDPKs廣泛參與植物生長發育、病原防御、非生物環境脅迫等生理反應的信號傳遞過程。目前在水稻中已發現31個CDPKs基因,但功能明確的只有少數幾個基因,本研究的目的就是利用超量表達和RNA干涉(RNA interference,RNAi)技術分析水稻OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29的功能,為利用基因工程技術培育水稻新品種提供新的基因資源和理論指導。本研究的主要試驗結果如下: 1.通過RT-PCR方法檢測了OsCPK2、OsCPK15和OsCPK29三個基因在粳稻品種日本晴分蘗期的根、成熟葉片、穗尖至劍葉葉枕距離分別為0 cm、0-1cm、1-3 cm、3-5 cm、5-8 cm、8-12 cm、12-16 cm、16-20 cm、20-25 cm、25-30 cm、灌漿期稻穗(命名為P1-P12)中的表達譜。通過凍融法將重組質粒pBRSAg轉入根癌農LBA4404中,利用農介導法轉化葉盤,經篩選培養獲得植株。試驗結果顯示:OsCPK2和OsCPK29時期稻穗中表達量較高,在成熟葉片和P12時期稻穗中表達量很低,在分蘗期的根和幼穗中不表達;而OsCPK15在所檢測的各個組織和時期中表達量均很高。


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              蘿卜(Raphanus sativus L.)是一種重要的十字花科根菜類作物,具有較高的營養價值,在中國乃至世界都有廣泛種植。葡萄糖苷是一種重要的植物次生代謝產物,主要存在于蘿卜等十字花科植物中。硫苷及其降解產物在植物防御、風味形成以及人類預防中起重要的作用,此外,它還具有作為生物的潛力。MYB轉錄因子MYB28、MYB29、MYB76等是硫苷生物合成過程中的關鍵調控基因,其表達量的多少直接影響蘿卜中硫苷的含量和分布。調控基因的某些特性在擬南芥、花椰菜、芥菜、小白菜、大白菜等十字花科作物已有廣泛研究,然而在蘿卜研究領域關于MYB28和MYB29的分子特性、表達特征尚未見報道。生物信息學分析顯示,ScBG1基因DNA序列全長1175bp,編碼332個氨基酸,含有1個長度為156bp的內含子。因此,本以蘿卜品種'NAU-ZQH'為材料,通過比對擬南芥中MYB28和MYB29的序列與本實驗室蘿卜轉錄組序列,蘿卜中調控硫苷合成的兩個關鍵基因RsMYB28和RsMYB29,之后從亞細胞定位、轉錄活性和表達特征等多方面進行研究,以期,增加對蘿卜中RsMYB28和RsMYB29基因分子特性和表達特征的認識,為后期通過基因改良培育出硫苷含量較高的蘿卜新品種提供理論基礎。


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