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發(fā)布時(shí)間：2021-10-22 02:01
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凍存袋技術(shù)
是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存，可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來，這樣在需要的時(shí)候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。
凍存袋細(xì)胞復(fù)蘇操作步驟
1.操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套，防止冷凍管可能爆裂之傷害。
2.自液氮或干冰容器中取出冷凍管，檢查蓋子是否旋緊，由于熱脹冷縮過程，此時(shí)蓋子易松掉。
3.將新鮮培養(yǎng)基置于37℃水槽中回溫，回溫后噴以70酒精并擦拭之，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。
4.取出冷凍管，立即放入3℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內(nèi)全部融化，以7O%酒精擦拭保存管外部，移入無菌操作臺(tái)內(nèi)。
5.取出解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入有培養(yǎng)基之培養(yǎng)容器內(nèi)(稀釋比例為1:10~1:15)，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。取0.1m1解凍細(xì)胞懸浮液作存活測試。
6.解凍后是否立即去除冷凍保護(hù)劑，依細(xì)胞種類而異，一般而言，大都不需要立即去除冷凍保護(hù)劑。惟若要立即去除，則將解凍之細(xì)胞懸浮液加入含有5-10m1培養(yǎng)基之離心管內(nèi)，離心 1000rpm，5分鐘，移去上清液，加入新鮮培養(yǎng)基，混合均勻，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
凍存袋介紹
細(xì)胞凍存是將細(xì)胞放在低溫環(huán)境，減少細(xì)胞代謝，以便長期儲(chǔ)存的一種技術(shù)。細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一，起到了細(xì)胞保種的作用。連續(xù)培養(yǎng)的細(xì)胞系容易發(fā)生遺傳漂變，有限細(xì)胞系終會(huì)發(fā)生衰老，所有培養(yǎng)的細(xì)胞都易受到微生物污染。已建立的細(xì)胞系是一種寶貴資源，更換細(xì)胞系成本高昂，而且耗費(fèi)時(shí)間。可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。
凍存采血袋的優(yōu)點(diǎn)
采血袋通過連接導(dǎo)管與一三通管相連;所述一三通管的三個(gè)孔設(shè)置方向?yàn)閮蓚€(gè)并列相反,一個(gè)向下方向,分別連接采血袋;第二三通管和轉(zhuǎn)移袋;所述第二三通管的三個(gè)孔分別連接轉(zhuǎn)移袋,細(xì)胞培養(yǎng)袋和細(xì)胞凍存袋;所述采血袋上設(shè)置有阻塞件,所述阻塞件由PVC套管和PC折芯組成;所述采血管;一三通管的主管和支管,第二三通管的主管和支管均設(shè)有止流夾.本實(shí)用新型提供的用于細(xì)胞培養(yǎng)的凍存袋從采血到所需成分冷凍保存一步到位減少了成分污染,保障了成分質(zhì)量要求.
