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發(fā)布時間：2020-12-31 05:54
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在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對動物介質(zhì)膽jian堿酯酶正常功能有抑制作用，從而達(dá)到殺蟲目的，其抑制率與農(nóng)yao藥的濃度呈正相關(guān)。酶抑制法，是研究最成熟、應(yīng)用最廣泛的快速農(nóng)殘檢測技術(shù)，主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。正常條件下，膽jian堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計或農(nóng)殘測試儀在412nm處測定吸光度的變化值（△A），計算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥殘留的存在。酶活力：空白對照1分鐘（3分鐘）吸光度變化值(ΔΑ0）在0.15-0.3（0.3-0.8）之間。
分析法，主要有分析和酶分析，常用的是酶聯(lián)分析（ELISA），基于抗原和抗ti體的特異性識別和結(jié)合反應(yīng)，對于小分子量農(nóng)yao藥需要制備人工抗原，才能進(jìn)行分析。酶抑制法，是研究成熟、應(yīng)用廣泛的快速農(nóng)殘檢測技術(shù)，主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。薄層色譜法(ThinLayerChromatogra2phy,TLC)是一種較成熟的、應(yīng)用也較廣的微量快速檢測方法,20世紀(jì)60年代色譜技術(shù)的發(fā)展,使薄層色譜法在農(nóng)yao藥殘留分析中得到廣泛應(yīng)用。檢測法，主要利用生物對農(nóng)yao藥殘留的敏感反應(yīng)，例如給家蠅喂食樣品，觀察率來判定農(nóng)殘量。該方法操作簡單，但定性粗糙、準(zhǔn)確度低，對農(nóng)yao藥的適用范圍窄。
樣品前處理及對照液、檢測樣品液的制備：
1) 對照液的制備：取酶100ul，蔬菜農(nóng)藥殘留檢測儀，緩沖液2.5ml，加入專用反應(yīng)瓶中，混勻，再加入顯色劑100ul，底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑，放入儀器進(jìn)行對照測試。
2) 檢測樣品液的制備：
a.取2g茶葉樣品放入三角瓶中，加入10ml緩沖液，快速農(nóng)藥殘留檢測儀， 振蕩提?。卜昼姾筮^濾，取出清液即為待測試液。
b.取酶100ul，待測試液2.5ml，加入專用反應(yīng)瓶中，混勻靜置抑制10分鐘后，（按儀器顯示的時間計時）加入顯色劑 100ul，底物 20ul 。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘試劑。
