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蛋白結晶板實驗研究

大分子生物藥以晶體形式作為給藥的方式具有穩定性高,有效成分濃度高以及容易實現的可控性釋放等許多優點.然而,,截至2004年的150多種生物藥中,以晶體為其主要的生產和銷售形態的只有胰島素.造成這種情況的主要技術原因是因為蛋白質結晶和小分子結晶相比具有更為復雜的結晶環境和影響因素,大規模生產蛋白質晶體在方法和技術上還很不成熟。

蛋白質晶體板

進而進行衍射得到蛋白質結構相關信息.蛋白質結晶需要經歷從未飽和區經亞穩區至形核區的形核過程以及從形核區到亞穩區的生長成熟過程.在整個蛋白質結晶過程中,形核過程是至關重要的一步，形核勢壘低.因而形核劑的使用對于難結晶蛋白或者起始濃度過低的蛋白質結晶具有重要意義.隨著結構生物學的發展,形核劑在蛋白質結晶中的研究仍是結晶方法學領域的熱點問題。

蛋白結晶板

提出了一個適用于蛋白質結晶過程的基于晶體形狀結構的群體粒數衡算模型.在該模型中,蛋白質晶體的形狀被定量描述為每個晶面到晶體幾何中心的距離,由此提出了基于蛋白質晶形的多維粒度分布,即形狀分布的概念.應用非線性回歸的方法,確定了四方系溶菌酶的結晶動力學方程參數.結合本提出的基于晶體形狀結構的群體粒數衡算模型。

溫度控制作為調控蛋白質結晶過程的手段,在結晶實驗中被廣泛采用.熱歷史 效應作為蛋白質結晶實驗中新的影響因素,已被越來越多的科學家所重視.控制溫度可以改變蛋白質的溶解度,進一步改變溶液的過飽和度,從而影響結晶過程.我 們簡要總結了溫度對蛋白質結晶的影響及應用溫度技術控制蛋白質晶體生長的各種技術,為蛋白質結晶工作提供理論和實驗依據.。

生長蛋白質晶體是X射線衍射技 術解析蛋白質分子結構的主要瓶頸問題之一.影響蛋白質結晶的因素很多,其中溫度是影響蛋白質結晶的重要因素,但在實踐中并未受到廣泛重視.總結了恒溫和變 溫對蛋白質可結晶性和晶體質量的影響,發現溫度控制既可以獲得更多的蛋白質結晶條件,又可以提高蛋白質晶體質量,因此,溫度控制是蛋白質結晶工作中應當考 慮的重要因素。