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發(fā)布時(shí)間:2021-05-12 06:48  
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親和柱的測(cè)定原理
親和柱,吸附力高柱容量大,適合于和HPLC、LC-MS及DON酶免分析試劑盒結(jié)合使用,定量檢測(cè)DON。適用于谷物、飼料等樣本中的DON凈化處理,提高了樣品的純度,純化后的提取液可用不同的分析方法測(cè)定。
測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原反應(yīng),抗嘔吐毒素(DON)的連接在柱內(nèi)凝膠介質(zhì)上,樣品中的DON經(jīng)過(guò)提取、過(guò)濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢通過(guò)DON親和柱,在親和柱內(nèi),DON與結(jié)合,洗滌液通過(guò)親和柱除去未被結(jié)合的雜質(zhì)。之后洗脫DON,然后進(jìn)行相關(guān)分析。
親和柱親和層析過(guò)程中的注意事項(xiàng)
1、上樣
親和層析純化生物大分子通常采用柱層析的方法。親和層析柱一般很短,通常10cm左右。上樣時(shí)應(yīng)注意選擇適當(dāng)?shù)臈l件,包括上樣流速、緩沖液種類、pH、離子強(qiáng)度、溫度等,以使待分離的物質(zhì)能夠充分結(jié)合在親和吸附劑上。
2、洗脫
親和層析的另一個(gè)重要的步驟就是要選擇合適的條件使待分離物質(zhì)與配體分開(kāi)而被洗脫出來(lái)。親和層析的洗脫方法可以分為兩種:特異性洗脫和非特異性洗脫。
親和柱——親和層析的應(yīng)用
親和層析(Immunoaffinity Chromatography,IAC),或親和色譜,是利用生物體內(nèi)存在的抗原、抗體之間高度特異性的親和力進(jìn)行分離的方法。 親和層析的應(yīng)用主要是生物大分子的分離、純化。
親和層析測(cè)試應(yīng)用
一種基于層析測(cè)試(ICT)試紙的親和層析測(cè)試。有別于普通臨床檢測(cè),該試紙?zhí)峁┝丝焖俚脑\斷手段。使用ICT,技術(shù)人員無(wú)需使用實(shí)驗(yàn)室,即可在患者的床邊進(jìn)行測(cè)定。 ICT檢測(cè)對(duì)引起微生物高度特異。