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              厭氧低溫生物菌種報價的行業(yè)須知「開碧源」

              發(fā)布時間:2021-10-28 04:18  

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              低溫生物知多少?

              實驗室的傳代保藏過程

              1. 按說明書要求復(fù)溶菌粉,轉(zhuǎn)種于適當(dāng)?shù)脑鼍囵B(yǎng)基內(nèi)(G1),復(fù)壯后轉(zhuǎn)接至平板上,并于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時間,分離出單個純種菌落,此為第2代(G2)。

              2. 鑒定完成后,挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管,同時挑取純菌落轉(zhuǎn)接斜面作為工作用。此時,保藏為第2代,但工作用則為第三代。

              3. 將第2代管冷凍保存,將工作用于適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時間后可用于試驗。

              4. 取一支冷凍保存的G2代轉(zhuǎn)種于平板和斜面培養(yǎng)基上,平板上的制成冷凍保藏管第三代(G3),斜面培養(yǎng)基經(jīng)適當(dāng)溫度下培養(yǎng)適當(dāng)時間后用作工作用(W3)。

              5. 將第三代(G3)冷凍或低溫保存,將生長、轉(zhuǎn)種后的G2經(jīng)滅菌處理后丟棄。

              6. 當(dāng)工作用代數(shù)小于5時,可直接用上一代工作用轉(zhuǎn)接下一代工作用,如W3可直接轉(zhuǎn)接為W4。

              7. 按上述程序操作,直至G4轉(zhuǎn)為W5為止,需重新開啟安瓿,再重復(fù)上述操作程序、保藏和使用。

              以上方法中,被分為兩類。傳代用和工作用,傳代用用于甘油冷凍管法保藏,工作用用斜面低溫保藏法保藏。

              實驗證明,甘油冷凍管的有效期至少為2年,但其主要適用于細菌(需氧)、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應(yīng)用其它方法。




              低溫生物產(chǎn)品特性

              自古以來生物的產(chǎn)品具有高選擇性、高轉(zhuǎn)化率和高轉(zhuǎn)化速度的特性,可以在常溫、低壓或中壓的發(fā)酵條件下進行生產(chǎn)。該產(chǎn)品還具有以下特點:

              1、易工程化:采用通用性強的發(fā)酵工藝和設(shè)備,適應(yīng)規(guī)模化生產(chǎn);

              2、高度靈活:代謝對H?/CO/CO?沒有比例要求;

              3、條件溫和:常溫、低壓或中壓等溫和條件下操作;

              4、耐受性高:抗雜菌、對硫化物等常規(guī)雜質(zhì)具有較強耐受性;

              5、高經(jīng)濟性:生產(chǎn)項目建設(shè)投資低,1-2年可收回建設(shè)投資,投資回報率高;

              6、綠色生產(chǎn):利用H?、CO和CO?氣體,固定二氧化碳, 節(jié)能減排降污染,能耗低,低水耗,環(huán)境友好。




              低溫生物菌種純化方法

              1、傾注平板法

              首先把微生物懸液通過一系列稀釋,取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合,然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中,待凝固之后,把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。單一細胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落,取單個菌落制成懸液,重復(fù)上述步驟數(shù)次,便可得到純培養(yǎng)物 2、涂布平板法

              首先把微生物懸液通過適當(dāng)?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上,然后用無菌的玻璃刀把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上,經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。3、平板劃線法

              簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多,常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、四格法等。當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時,接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋,然后在所劃的線上分散著單個細胞,經(jīng)培養(yǎng),每一個細胞長成一個菌落。

              2、富集培養(yǎng)法

              富集培養(yǎng)法的方法和原理非常簡單。我們可以創(chuàng)造一些條件只讓所需的微生物生長,在這些條件下,所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭,在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創(chuàng)造的條件包括選擇合適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件下,經(jīng)過多次重復(fù)移種,然后富集的菌株很容易在固體培養(yǎng)基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌,就必須把樣品接種到相應(yīng)敏感宿主細胞群體中,使其大量生長。通過多次重復(fù)移種便可以得到純的寄生菌。





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