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              發布時間:2021-08-09 23:57  

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              ELISA可用于測定抗原,也可用于測定。然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環節的才能充分發揮其方法學的優點。

              特點編輯一、、靈敏、特異的;二、穩定的重復性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用、血漿、組織勻漿液、細胞培養上清液、尿液等等多種標本類型;五、節省實驗經費。



              加酶標:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“ ”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。



              主要設備編輯試劑(1) 包被緩沖液(PH9.60.05M碳酸鹽緩沖液):Na2CO3 1.59克NaHCO3  2.93克加蒸餾水至1000ml(2) 洗滌緩沖液(PH7.4PBS):0.15MKH2PO4  0.2克Na2HPO4·12H2O 2.9克NaCl 8.0克KCl 0.2克Tween-20 0.05% 0.5ml加蒸餾水至1000ml(3) 稀釋液:牛白蛋白(BSA) 0.1克加洗滌緩沖液至100ml或以羊、兔等與洗滌液配成5~10%使用。



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