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              發(fā)布時間:2021-09-16 20:46  

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              組成編輯完整的ELISA試劑盒包含以下各組分:(1)已包被抗原或的固相載體(吸附劑);(2)酶標記的抗原或(結合物);(3)酶的底物;(4)陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),參考標準品和控制(定量測定中);(5)結合物及標本的稀釋液;(6)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;(7)酶反應終止液,常用的HRP反應終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的終體積而異,在板式ELISA中一般采用3mol/L。



              哺乳動物細胞溶質中的SOD呈綠色,并且由兩種亞單位構成,一種含有銅,另一種含有鋅(Cu/Zn-SOD)。線粒體和細菌SOD為紅紫色并含有錳(Mn-SOD)。E.coli含有Mn-SOD和Fe-SOD。為了測定SOD的活性,研究人員嘗試了許多間接的或者直接的方法,其中,NBT的間接法為常用,因為它很方便。但是,NBT法有幾個缺點,例如生成的染料水溶性差,而且會和氧化酶的還原型發(fā)生反應。雖然cytochrome C法也常被用來做SOD檢測,但它和超氧化物反應過于劇烈,不能測定低水平的SOD。



              使用貼壁細胞時:① 棄盡培養(yǎng)液,向培養(yǎng)皿中加入650 μl的Solution A,室溫靜置1分鐘。注)96孔板等的每個孔中一次容納不了650 μl 溶液時,請分數(shù)次處理細胞。② 用移液的頭吹落貼壁培養(yǎng)細胞,取650 μl的細胞懸浮液轉移至Collection Tube中。③ 加入0.8 μl的RNase A1,激烈振蕩15秒鐘,然后室溫靜置1分鐘。2. 加入400 μl的Solution B,振蕩混合。3. 加入1 ml的4℃預冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。4. 棄去上層有機相,再加入1 ml的4℃預冷的Solution C,充分混勻后,12,000 rpm離心2分鐘。



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