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              佛山氨丙基SPE柱批發性價比出眾「多圖」

              發布時間:2021-03-20 02:14  

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              廣州碩譜生物科技有限公司,SPE小柱,是目前國內生產SPE小柱較好的生產廠家。氨丙基SPE柱批發

              為何在 SPE操作中會出現流速非常慢或流速不一致,回收率較低,且平行性差?也許很多小伙伴都遇到過這樣的問題。小子選錯了,方法有問題嗎?或者填充材料的粒度分布不均勻,填充松緊度不穩定?實際上 SPE小柱每批流速都有嚴格的質量控制范圍,在質量控制范圍內的小柱可以保證穩定的流速,超出質量控制范圍的小柱將作為異常品處理。那么,是否可以采用一種穩定的方法,用出廠流速測試合格

              實際上還有一個很容易被大家忽視的細節也會導致流動速度過慢: SPE小柱在運輸過程中篩板和填料可能會發生微小的松動,導致空氣進入填料(一般不容易被肉眼看到),含氣填料在氣壓下會導致溶劑流動緩慢。這一點大家都能理解,為什么同一批小柱子會出現流速不平衡的情況

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              正壓除氣泡

              試樣數量較少,填充量較小,人工施加正壓較為方便,可采用針筒連接接頭法進行正壓排除氣泡。

              □負壓排泡

              試樣量較大,填料量大,人工施加正壓不便,可用真空泵連接固相萃取裝置,負壓排出氣泡。

              1.2排氣泡的時間?

              在 SPE操作中,一般包括平衡活化、上樣、淋洗、洗脫四步。是否每個步驟都需要一個排氣泡?但是,一般情況下,當填料之間有空隙時,需要排出氣泡,例如,當平衡液被激1活后,需要排出氣泡,使溶液能更好地與填料接觸。

              另外還有一個容易忽略的環節也是需要排出氣泡的,一般淋洗后需要進行抽干操作,抽干后填料間也會有空氣進入,加入洗脫液后,也是要排出氣泡的,否則大量的氣泡也會嚴重影響洗脫液的流速和洗脫效果。



              在選擇固相萃取機理時,應根據目標化合物和干擾物的性質考慮采用哪種萃取機理,因為許多化合物同時具有多種功能基。例如:2-萘胺是一弱堿性化合物(pKa=4.16),它在一定 pH條件下也可呈陽離子態,同時它又具有疏水性和親水性的非極性官能團。此時,應根據樣品基質的具體情況,選擇有利于從干擾物中分離目標化合物的萃取機理。當樣品基質中同時含有大量非極性干擾雜質時,應盡量避免采用非極性萃取機制,而應采用以 pKa以下兩個 pH單位或以 pH=2.16為限的陽離子交換機制。相反,如果樣品中同時含有大量干擾雜質陽離子,則應調整樣品 pH值至6.16 (比 pKa 2單位高),采用非極性萃取機制更為有利。

              骨架形狀,粒徑,孔徑

              硅的基質形態一般可分為非晶態和球態。無定型C18材料具有較高的性能價格比,是初步提純的首1選。且C18具有較好的顆粒均一性、較高的柱效和分離性,但相對價格可能稍高,可作為精制的選擇。

              現在市場上可供選擇的填料粒徑很多,中低壓備通常是為了增大上樣量,增加流速,減小壓力而選用大粒徑填料;由于可以達到較高的柱效,因此小粒徑填料更適合高1效液相或高壓制備。在選擇填料時還應充分考慮孔徑,分子量小于5000 da時選擇孔徑(80~120 da),而對于蛋白質大分子分子量20000 da左右、分子量大于20000 da的樣品,通常不采用C18分離模式,采用 SEC等模式進行分離。




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              普通反相液相色譜柱是一種性價比極1佳的產品。C18反相層析柱

              采用全覆蓋鍵合硅膠作填料,穩定性好。采用獨特的單官能團化學鍵技術可以避免C18分子層的合成。涂覆均勻,保證了高選擇性、高1效率的固定相分離。

              普通反相液相色譜柱具有優異的穩定性, pH適用范圍較寬(1.5~11),峰形優良。而且抗污染能力強,柱子使用壽命長。

              一般情況下,反相液相色譜柱在使用緩沖液時還需注意以下事項:

              (a)避免使用鹽酸鹽,因為它會腐蝕鋼制品;

              (b)緩沖液較好的是現在就用,通常緩沖液是好的菌1種培養液,隔天或放一段時間后就會出現許多怪現象;

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              使用緩沖液時要及時掌握 pH值,做到胸中有數;

              (d)有溫度控制的洗液道和柱子加熱到30攝氏度,便于沖洗;

              (e)長時間使用緩沖液應注意觀察接頭處是否有沉淀,如有白色鹽沉淀,用10%硝1酸定期沖洗液路(拆除柱子,沖洗30 mL10%硝1酸溶液,再用5倍水沖洗)可避免液路堵塞;

              (f)使用可靠的試劑來選擇緩沖液,以避免不純鹽帶來的不必要麻煩;

              轉化流相是指有機相和水相的組成與分析流相相同,但溶液中沒有緩沖鹽。




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