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發布時間:2021-09-11 17:09  
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固相萃取柱的影響因素
1) 吸附劑
目前常用的吸附劑有正、反相吸附劑、離子交換吸附劑和抗體鍵合吸附劑等,試驗時盡量選擇與目標化合物極性相似的吸附劑,其用量大小與目標物性質(極性、揮發性)及其在水樣中的濃度直接相關。
2) 洗脫溶劑
在SPE中,洗脫溶劑的選擇與目標物性質及使用的吸附劑有關,樓蔓藤等給出了常見溶劑的極性和洗脫強度,試驗過程中可根劇被測物的物理、化學性質選用。洗脫劑體積應以淋洗完全為前提,體積小的較佳,可通過多次洗脫法(小體積),根據回收率的變化曲線找到較佳的洗脫液體積,顯然,洗脫體積越小富集倍數越高。
固相萃取柱的操作方法介紹
一、反相萃取柱操作
從極性基體中提取非極性的樣品
1、活化:以3-5毫升去離子水(或緩沖液)淋洗萃取柱并保持萃取柱濕潤
2、上樣:以合適的流速使樣品均勻通過萃取柱
3、清洗:以5毫升適當極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱(常用的有純水,緩沖液,水/溶劑混合液)
4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升非極性溶劑分批洗脫至收集容器
二、正相萃取柱操作
從非極性基體中提取極性的樣品
1、活化:3-5毫升非極性溶劑淋洗萃取柱
2、清洗:以5毫升適當非極性的溶劑洗脫吸附樣品的萃取柱
3、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升極性溶劑分批洗脫至收集容器
三、離子交換萃取柱
提取帶電荷的樣品
1、活化:以3-5毫升去離子水/或低離子強度的緩沖液淋洗萃取柱
2、上樣:以較低的流速,使樣品均勻通過萃取柱
3、清洗:5毫升去離子水/或低離子強度的緩沖液淋洗萃取柱
4、洗脫:將被測樣品,用1-5毫升高離子強度的緩沖液洗脫至收集容器
固相萃取柱的選擇及常見問題
根據基質性質選擇:
吸附劑主要可根據目標化合物性質和基質性質進行選擇。
吸附劑的選擇則大致可由以上兩種方式進行選擇,對于具體實例,可依據“區分目標化合物和主要干擾物”的原則進行選擇。
選擇出適宜的吸附劑后,還需要根據檢定所需的樣品量選擇合適的柱規格。由于萃取柱的吸附劑能吸附的化合物質量是有限的,一旦超過了這個數值,目標物就不能被有效保留,使得洗脫效果大打折扣。因此,根據樣品中的組份量選擇合適的柱規格,是很有必要的。
固相萃取柱——萃取技術介紹
固相萃取的前身就是柱層析技術。然而,人們在實踐中發現,如果一篇文獻中所提到的樣品前處理采用的是柱層析的方法,要重復文獻所提及的實驗往往是十分困難的。其主要原因之一就是實驗室自行裝填的層析柱填料來源不一,裝填的密度不一。當然,得到的結果也就不同。這也是阻礙柱層析技術廣泛應用的一個主要原因。