您好,歡迎來到易龍商務網!
發布時間:2020-12-21 06:04  
【廣告】





水中糞大腸菌群的常見檢測方法
1、聚合酶鏈式技術
提取糞大腸菌群混懸液和待測水樣的DNA,利用PCR技術擴增編碼約260bp的LacZ基因(β-半乳糖苷酶基因)和約150BP的UdiA基因(β-D-半乳糖苷酶基因)的DNA,分別檢測大腸菌群數和大腸桿菌。
2、熒光原位雜交技術
由于糞大腸菌群特異的DNA序列,借助熒光標記的特異寡聚核苷酸片段作為的探針與待測水樣中的DNA分子雜交,將雜交細胞經熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量分析,確定菌群數。
目前,大腸菌群檢測方法發展很快,已提高到分子生物學水平,使檢測更快速、準確。酶底物法以其操作簡便、檢測周期短,將取代多管發酵法、濾膜法等傳統方法,尤其是酶底物法采用密封培養技術,在檢測醫院污水時可以減少人員接觸而降低檢測人員的致病風險,因此具有更強的實用價值和應用價值,正是目前水中糞大腸菌群的快速檢測標準方法之一。
酶底物法
方法靈敏度不同,多管發酵法為每 100 m l樣本中 2 cfu;酶底物法為每 100 m l樣本中1 cfu。
方法步驟不同,多管發酵法為多步驟測定,費時費力; 酶底物法為一步測定,省時省力。
方法耗時不同,多管發酵法對于陰性水樣需 24 h 報告結果,對于陽性水樣則需72 h報告結果; 酶底物法無論陰性或陽性水樣均可24h報告結果。
方法費用不同,多管發酵法可使用半成品培養基或自配培養基,檢測成本低廉,目前國內也開發有初發酵試驗的成品培養基和一次性耗材,但由于陽性水樣必須進行驗證試驗,從而限制了該商品試劑的應用推廣;酶底物法使用商品試劑,目前均有國內外生產商供應,該方法在東部經濟發達地區使用較廣泛。我們國內也逐步完善替代傳統方法,酶底物法檢測程控定量封口機會越來越受歡迎,用戶也越來越多。
食品大腸桿菌菌群檢測--平板計數法
相比于MPN計數法,平板計數法更適用于大腸菌群含量較高的食品。但大腸菌群多少算是含量較高呢?國標里沒有明確規定,但通常認為,產品大腸菌群以100CFU/g(mL)為界,超過這個含量一般認為是含量較高。但具體什么時候選用平板計數法進行大腸桿菌菌群的檢測,大部分情況還是要看你的產品執行的標準。假如產品標準要求大腸菌群含量的單位為CFU/g(mL),那必須選用平板計數法。若是/g(mL)或者MPN/100g(mL),就應選擇MPN計數法,MPN法具體選用哪版國標此處不再贅述。因此,根據自己產品的情況選擇適當的檢測方法。