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發布時間:2021-01-20 22:02  
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親和柱原理介紹
親和層析(IAC)可稱為色譜技術,是一種利用抗原特異性可逆結合特性的SPE技術,根據抗原的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價結合,然后裝入小柱,將被測溶液流過親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原(被測物),從而得到純化的抗原(被測物),收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計檢測。
親和柱介紹
生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用,這些親和作用屬于生物專一性識別;此外,某些物質和生物大分子之間還有一些特異性作用,如染料和某些酶(特別是脫氫酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金屬離子和蛋白質表面的組氨酸等之間的作用,都可以應用于親和分離過程。
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親和柱——特點介紹
1. 回收率好,且速度快:相比市面上常見的瓊脂糖基質的肝素親和小柱,納譜分析采用單分散聚酸酯基質開發的肝素親和小柱滴速更快,相同裝量下滴速可以快1~2倍,加快了前處理的時間;
2. 使用輕松,不懼流干:基質的機械強度高、化學穩定性好,即使小柱流干再次潤濕也同樣保證回收率。
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親和柱適用注意事項
(1) 嘔吐毒素對人體有害,應戴手套操作。凡接觸到標樣的玻璃器皿都要用5%次酸鈉浸泡過夜。
(2) 不要使用過有效期的親和柱。
(3) 親和柱應在2~8℃保存。不要冷凍。
(4) 使用前,親和柱需至少提前半小時回溫至室溫(25℃左右)。
(5) HPLC液相測定值、試劑盒計算值接近zui高檢出值時,樣本的實際含量可能大于柱容量而造成流穿,建議減少上樣體積重新過柱。
(6) 稱取的樣品量以及提取液的體積可根據實際情況按比例調整,建議不少于10g樣。