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              培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁可能是什么原因?

              發(fā)布時(shí)間:2022-09-27 09:17  

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              培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁的原因可能如下:
              1.支原體污染.
              2.培養(yǎng)瓶瓶底不干凈.
              3.培養(yǎng)液pH 值過堿(NaHCO3 分解).
              4.消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過期儲存、儲存不當(dāng).
              5.細(xì)胞老化(如傳代前細(xì)胞已匯合導(dǎo)致失去貼附性).
              6.接種細(xì)胞起始濃度太低或太高.
              建議解決方法:
              1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度.
              2.分離培養(yǎng)物,檢測支原體.清潔支架和培養(yǎng)箱.如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物.
              3.注意刷洗,或換用一次性塑料培養(yǎng)瓶.
              4.使用無菌醋酸溶液調(diào)整pH 值或充入無菌CO2(將培養(yǎng)液敞口放入培養(yǎng)箱也可).
              5.重新配置消化液或培養(yǎng)液.
              6.啟用新的保種細(xì)胞.

              7.調(diào)節(jié)**接種細(xì)胞濃度.