鎮江亞細胞定位服務廠家品牌企業「多圖」

武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業從事生物醫學技術服務、技術咨詢及產品開發的生物技術服務企業。公司坐落于武漢光谷，由3位歸國博士創辦。基因槍GDS-80轟擊時氦氣罐的氣壓為1300psi，取10μLDNA包裹好的微粒懸浮液加到基因槍中央，進行轟擊，之后放置25℃避光過夜培養，使用ConfocalLaser激光共聚焦顯微鏡觀察。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺。現憑借自身技術特色，依托光谷生物城技術產業優勢，面向全國提供生物技術服務。

蛋白分布在細胞中的各個位置，其中蛋白豐度高，種類豐富的研究比較深入。定位注釋結果準確的區域有細胞核，原生質體，線粒體，內質網等，植物還有葉綠體和液泡。注意:1、不建議將爬片泡酸后高壓滅菌，首先玻片太薄高壓容易使玻片變形，其次濕滅很容易使玻片上留下水漬影響細胞貼壁。而對于定位在細胞膜，分泌蛋白或者定位在多個區域的蛋白來說，其亞細胞定位預測信息一般準確性較低。

通過對目的蛋白的標記，例如融合綠色熒光蛋白GFP，使用掃描共聚焦顯微鏡激發熒光，從而對蛋白的表達分布予以確認。依據對亞細胞分布的準確度不同，亞細胞定位的實驗設計也分成簡化型亞細胞定位分析和內參型共定位分析。以單細胞RNA-seq技術為基礎的轉錄組學分析技術的革命性提升，實現了單細胞內部數以千萬個轉錄本的同時檢測，完整地勾勒出各細胞活動之間的動態關聯。對于植物蛋白的亞細胞定位分析，主要通過構建融合熒光蛋白的過表達質粒，轉化煙1草和原生質體瞬時表達體系確定其定位及共定位情況。

原理：構建編碼目bai標蛋白和熒光蛋du白的融合蛋白的載體，轉染細胞，表zhi達，然后激光共聚焦顯微鏡dao觀察熒光信號所在位置，即可知道該蛋白的亞細胞定位。注意做空載熒光蛋白的對照。

具體步驟：構建目標蛋白與GFP的融合蛋白的瞬時表達載體，基因槍轟擊洋蔥內表皮細胞，或化學（PEG）轉化原生質體，瞬時表達后用熒光顯微鏡觀察熒光位置，當然激光共聚焦圖片會更漂亮。