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發(fā)布時(shí)間：2021-10-24 03:06
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三羥甲基氨基甲烷-HCl緩沖液是指三羥甲基氨基甲烷與鹽酸組成的緩沖溶液，是生化實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用非常多的一種生物緩沖劑。三羥甲基氨基甲烷有很高的緩沖能力，在水中溶解度高，對(duì)很多酶反應(yīng)是惰性的，使三羥甲基氨基甲烷成為用于許多生化目的非常滿意的緩沖液。在使用上我們也建議發(fā)現(xiàn)變色或者里面有雜質(zhì)的產(chǎn)品盡量不要使用，以免造成其他的損失。
立即測(cè)定三羥甲基氨基甲烷-HCL緩沖液的pH。緩沖液置室溫中待溫度降至23°C時(shí)。以室溫的蒸餾水調(diào)零。室溫的混合磷酸鹽定標(biāo)(23°C時(shí)pH為6。86), 再立即測(cè)定其相應(yīng)的pH。溶液繼續(xù)置室溫中。待溫度降至室溫對(duì)。再.調(diào)溫度旋鈕。定標(biāo)并測(cè)定室溫時(shí)的pH。三羥甲基氨基甲烷全稱三(羥甲基)氨基甲烷, CAS號(hào)為 77-86-1, 25°C 下的pKa為8.06,緩沖范圍7.0-9.0。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:按照以上方法測(cè)得37°C的pH比23°C的pH平均低0。18。 比12C時(shí)的pH平均低0。32,溫度變化對(duì)緩沖液pH值的影響很大，所以- -定要在使用溫度下進(jìn)行配制,室溫下配制的三羥甲基氨基甲烷-HCl緩沖液不能用于o°C ~4°C。三羥甲基氨基甲烷緩沖液是非常 重要的生物緩沖劑，其優(yōu)點(diǎn)如下:1、三羥甲基氨基甲烷堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液。
可見(jiàn)，三羥甲基氨基甲烷-HCL緩沖液的pH受溫度變化影響較大，不同方法測(cè)定時(shí),變化值不同,兩種溫度(37°C, 23°C)的pH值變化,跟測(cè)定方法有太大關(guān)系，故我們推測(cè)，若要測(cè)定溶液在某溫度下的pH值。必須不僅將酸度計(jì)的溫度補(bǔ)償值也要將所有各種溶液及蒸餾水一并調(diào)節(jié)到測(cè)定溫度。常見(jiàn)的三羥甲基氨基甲烷緩沖液有三羥甲基氨基甲烷-HCl緩沖液、三羥甲基氨基甲烷-磷酸 鹽緩沖液以及多種衍生緩沖液，如TBS、 Te等。
