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發布時間:2021-08-13 19:08  
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反相色譜分離后,如何快速從流動相中得到產品?
可以考慮先在低溫下,減壓旋蒸除去其中的有機的溶劑,然后用萃取的方法把產品萃取出來,然后再低溫再旋蒸,這樣,就可以不將溫度升得很高而得到產品。如果要直接蒸掉流動相,水泵的真空度要注意(要檢查氣密性),否則蒸水會很慢。一般比較好的泵在60~70度即可蒸掉水,如果泵的真空度不好,可能需要80~90度才行,這樣容易暴沸導致樣品損失。溫度太高可能引起物質變性。
制備色譜的填充
填料是工業制備色譜的血脈,填料的選擇和利用是非常關鍵的,目前已有越來越多的產品應用到IPC中。填料的化學性質和物理性質決定了色譜的分離性能和動力學性能。應用于大規模工業化制備色譜中的填料具有如下特殊的要求。
1、機械強度高:填料需要承受很大的機械壓力,因為填料在IPC使用中,需要經常裝卸,機械性能差的填料經受不住反復填充,它們易破碎,產生細顆粒,降低柱滲透性,甚至堵塞濾片,造成流速分布不均勻,影響分離產物的純度,在系統中產生極高的柱壓而無法繼續使用引。
2、負載量大:在IPC中,填料的負載量越大,則單位體質量填料可處理的原料量就可增加,因而提高了產率。選擇合適孔徑及孔徑分布的填料是獲得高負載量的一個關鍵因素。
3、可大量供應,批間的重現性好:制備色譜工藝過程要擴大,必須有可靠的供貨源提供大量填料,否則無法實現工業化。填料各批量之間的化學和機械穩定性、孔結構及可重復的比表面積等必須具有高度的重現性,否則難以保證長期、持續、穩定的分離與純化生產工藝。
4、合適的顆粒大小和窄的粒度分布范圍:細顆粒可增加塔板數及分辨率,但同時引起裝柱困難,需要更高的操作壓力。
工業制備色譜
工業色譜又稱制備色譜。利少{J組分的差速遷移而實現I.業規模混合物分離的方法它包括一個流動相(被分離的氣相或液相)和一個固定相。兩相在色譜柱r},進行接觸,在色譜柱‘l,流動相沿固定相流動,由」幾混合物中各組分被固定相滯流程度不同,它們隨流動相移動的速度就不同,因而可使各組分.4.相分離。根據流動相的不}.可,可分為}L相色譜與液相色譜兩類。根據固定相的類型,可分為吸附色譜、分配色iH離子交換色譜、親和色潛‘排I}}L色譜五類。上業色譜可分離選擇性系數非常接近的組分,它適用于熱敏N}物質的分離,對制備高純物質特別有效
蛋白質的特點使得其分離過程與傳統化工分離過程有著極為不同的特點:(1)分離對象是具有特定的生物活性的生物大分子產品,分離過程設計中不恰當的物理和化學環境等(如溫度、PH值、緩沖液選擇、、攪拌和剪切力等)皆有可能引起其蛋白質分子結構發生改變,從而使之失活;(2)由于發酵液、細胞培養液或勻漿液中,我們所需要的目標產物往往存在于含有許多性質十分相似的雜質的稀溶液中,如何從這樣一種復雜的稀溶液中經濟有效地提取產物是生物分離技術面臨的重大課題;(3)從衛生和安全角度出發,對于用基因工程產品,有著極高的純度和同一性要求,對其中的有害雜質去除率要求極高,對分離設備材質和分離過程中引入的分離介質也有著嚴格的限制。