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發(fā)布時間：2021-06-13 04:36
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生物有機(jī)肥產(chǎn)品生產(chǎn)使用現(xiàn)狀
細(xì)菌類生產(chǎn)用除常見的芽孢外， 還出現(xiàn)了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環(huán)境中， 未見致病性報道， 屬風(fēng)險一級； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風(fēng)險一級 ， 但有從動物受傷部位分離到該菌的報道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風(fēng)險二級， 建議謹(jǐn)慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進(jìn)植物生長和生物修復(fù)等功能的細(xì)菌， 但同時也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風(fēng)險三級， 需做致病性試驗， 建議慎用或不用。真菌類生產(chǎn)用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風(fēng)險等級二級， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術(shù)準(zhǔn)則》 進(jìn)行毒理學(xué)測試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產(chǎn)朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風(fēng)險等級一級， 可免做毒理學(xué)試驗。
低溫生物對沙土有什么要求？
1 沙土管制備
將河沙用60目過篩，棄去大顆粒及雜質(zhì)，再用80目過篩，去掉細(xì)沙。用吸鐵石吸去鐵質(zhì)，放入容器中用10%鹽酸浸泡，如河沙中有機(jī)物較多可用20%鹽酸浸泡。24小時后倒去鹽酸，用水洗泡數(shù)次至中性，將沙子烘干或曬干。另取地面下40～60cm非耕作層貧瘠且粘性較小的土，研碎，100目過篩,水洗至中性，烘干。將處理后的沙、土按質(zhì)量比2∶1混合。混勻的沙土分裝入安瓿管或小試管中，高度為1cm左右，塞好棉塞，121℃濕熱滅菌30min。隨機(jī)抽取滅菌后的砂土管若干支，無菌條件下取少許砂土至營養(yǎng)肉汁培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)24小時，檢查無微生物生長后方可使用。
2 斜面培養(yǎng)物的制備
參照定期移植法。
3 制備菌懸液
向培養(yǎng)好的斜面培養(yǎng)物中注入3～5mL無菌水，洗下細(xì)胞或孢子制成菌懸液。用無菌吸管吸取菌懸液，均勻滴入沙土管中，每管0.2～0.5mL。霉菌可直接挑取孢子拌入沙土管中。
4 干燥
真空抽去沙土管中水分。
5 保藏
將沙土管用火焰熔封后存放于低溫(4～6℃)干燥處保藏，每隔半年檢查一次存活性及純度。或?qū)⑸惩凉苤苯佑门Ｆぜ埢蛩芰霞埌茫酶稍锲鲀?nèi)保存。
保藏時間2～10年。
6 恢復(fù)培養(yǎng)
無菌條件下打開沙土管，取部分沙土粒于適宜的斜面培養(yǎng)基上，長出菌落后再轉(zhuǎn)接一次。或取沙土粒于適宜的液體培養(yǎng)基中，增殖培養(yǎng)后再轉(zhuǎn)接斜面。
低溫生物的寄主分離法
即從生長有某種真菌的寄主體上(如茯苓、木耳木段)取下木片，進(jìn)行分離的方法。如木耳制種時，可選朵大、出耳多、質(zhì)厚的耳棒(即長有木耳的木段)。采集后，削去耳根下的樹皮，將其橫斷面鋸成1 厘米厚的木片，在無菌條件下，切去無耳菌絲部分，留下有耳菌絲部分，浸入0 . 1 %水中1 分鐘，取出再用無菌水沖去木片上的液。然后，用解剖刀將木片切成0 . 5 厘米的小塊，放入斜面培養(yǎng)基內(nèi)，置24 ~26 ℃下培養(yǎng)，及時淘汰雜菌，選取純菌絲進(jìn)行移植培養(yǎng)，即得。
