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發(fā)布時間:2020-09-09 05:10  
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但是這些細胞傳代的次數(shù)、培養(yǎng)的條件以及是否有污染等都無法得到保障,甚至有老師買了這種細胞做了很多的實驗都沒有結(jié)果,很長時間之后才發(fā)現(xiàn)細胞被污染了。為了讓您解除后顧之憂,我們建議您在獲得細胞系的時候、細胞傳代一段時間之后以及即將發(fā)表的之前,都對您的細胞進行 STR 鑒定。以確保您使用細胞的正確性。使用正確的細胞,是您實驗成功的一半。完整的細胞STR檢測報告請查閱(STR Report-Sample),報告上會列出受檢細胞系STR基因分型結(jié)果附表(圖2),表格中將列出所有實際檢測位點信息。第2列“Sample”為樣本檢測得到的STR位點信息, 該結(jié)果是根據(jù)實際PCR擴增后檢測到的片段長度得到的數(shù)據(jù)信息。第3列為ATCC、DSMZ等數(shù)據(jù)庫中標準細胞STR位點信息。數(shù)據(jù)庫中常規(guī)提供9個位點信息,即 Amelogenin, CSF1PO, D13S317, D16S539, D5S818, D7S820, THO1, TPOX, vWA。
STR基因座位上的等位基因可通過PCR(聚合酶鏈式反應(yīng))擴增區(qū)域內(nèi)重復(fù)序列的拷貝數(shù)的不同來區(qū)分,在毛細管電泳分離之后可通過熒光檢測來識別,隨后通過一定的計算方法 [2-3] ,即可根據(jù)所得的STR分型結(jié)果與專業(yè)的細胞STR數(shù)據(jù)庫比對從而推算出樣品所屬的細胞系或可能的交叉污染的細胞系名稱。
據(jù)統(tǒng)計約30%細胞系被交叉污染或錯誤辨識 ,因使用了交叉污染或錯誤辨識的細胞而導(dǎo)致研究結(jié)論錯誤、結(jié)果不可重復(fù)、臨床細胞治1療災(zāi)難性后果……,這浪費大量時間、精力和金錢。
要說一個實驗的大家怕什么,那把細胞養(yǎng)死了肯定榜上有名,
但是,還有一種情況更可怕,那就是——細胞還好好的,但是這個細胞它已經(jīng)不是原來的那個“身份”了!
所以,你新買到的細胞、實驗室傳了幾代的細胞、又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞,它真的還是原來的那個細胞嗎?
期刊要求細胞鑒定怎么辦?較靠譜的是——細胞STR鑒定
其實細胞系認證的問題已經(jīng)存在了幾十年,2017 年,有機構(gòu)研究抽查了中國 28 個研究機構(gòu)中保存的 278 個細胞系,并對細胞進行鑒定。
調(diào)查結(jié)果顯示,有128 個細胞系是錯誤鑒定的,錯誤率高達46%。