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發布時間:2020-10-28 15:04  
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1、在離心管中加入樣品、研磨球、裂解液(可省),蓋上蓋;
2、將裝好樣品的離心管放入適配器中;
3、將適配器及裝有樣品的離心管浸入液氮中進行預冷凍;
4、將適配器裝到主機上,鎖緊固定裝置;
5、觀賞防護罩,按需求設定好參數后,開始研磨;
6、等儀器完全停止振動后關機,打開安全門,取出樣品;
7、儀器歸位。
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多樣品組織研磨儀與組織研磨儀兩者均為實驗室的常用的儀器工具,其主要適用于:研磨、細胞破碎、勻漿、材料分散、樣品混勻、材料分散、組織均質、振蕩等。對種子質量進行檢驗時需要取樣再研磨,像黃豆、豌豆這樣顆粒比較大的種子,尤其需要研碎,而對于取樣,很明顯,不可能對所有種子都研究檢驗。
應用范圍(區別-優勢):可研磨樣品:
植物組織(根、莖、葉、花、果、種子等)
動物組織(大腦、心臟、肺、胃、胸腺、腸、淋巴、肌肉、骨骼等)
真菌細菌(酵母等)
食品藥品 (各類食品、藥片等)
易揮發樣品(煤炭、油頁巖、蠟制品等)

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每50~100mg 組織加入0.2體積 TRIzol
1.加鋼球1顆,設置研磨儀參數:12單位振頻,1min,每種樣品基本充分勻漿
2. 將上述勻漿液每0.2體積 TRIzol 試劑用量的勻漿液中加入0.04體積氯方,蓋緊管蓋,手動劇烈震搖15 秒鐘,然后室溫靜置2~3 分鐘。
3. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
4. 小心吸取上層水相(無色)加入到新試管中,同時計算所吸取的水相體積。不必過多吸取,防止吸入DNA和蛋白雜質(中間層,白色)。
5. 加入所吸取水相等體積預冷的異丙淳,蓋緊管蓋,輕輕搖勻。
6. 室溫靜置10 分鐘,待RNA 充分沉淀(為減少RNA 降解,此步驟可省略)。
7. 4℃ 10,000g 離心10 分鐘。
8. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),每管加入0.2體積75%乙醇潤洗,蓋緊管蓋,輕輕晃動試管,以去除殘留的異丙淳和鹽份。4℃ 7,500g 離心5 分鐘。
9. 將上清棄除(注意別丟棄沉淀),打開管蓋,將RNA 沉淀干燥(室溫揮發或真空干燥)。注意RNA 沉淀不可完全干燥,否則難以溶解。
10. 將RNA 沉淀溶解于適量的無RNase 水中。如果RNA 沉淀溶解不完全,將使OD260/OD280≤1.6。此RNA 溶液可用于進一步實驗,或者-70℃保存。
