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發布時間:2021-05-02 14:00  
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武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;通過凍融法將重組質粒pBRSAg轉入根癌農LBA4404中,利用農介導法轉化葉盤,經篩選培養獲得植株??梢蚤_展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
目的構建通用型植物GFP標簽蛋白表達載體,研究蛋白質的細胞內定位對蛋白質組學和代謝組學等研究的意義。方法構建2種GFP標簽蛋白質表達載體,分別在GFP的N和C端預留位點,以目的基因。利用該基因載體,分別內切酶Fok I的切割結構域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯蛋白(Fok I:MCP:Fok I,FMF)至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP:FMF和FMF:GFP,其中FMF的N端帶有細胞核定位信號。利用農介導植物瞬時表達侵染本氏和洋蔥表皮細胞,觀察GFP熒光表達情況。結果成功構建了2種融合了目的基因和GFP的表達載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結果顯示侵染了只含GFP載體的農的細胞,可在細胞核和細胞質中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF:GFP和GFP:FMF 2種融合蛋白載體的農的細胞,只在細胞核中觀察到綠色熒光。利用DW-ACP-PCR(DNAWalking-AnnealingControlPrimer-PCR)技術對T-DNA右邊界側翼序列進行擴增,7個突變體都獲得了特異條帶。結論該載體系統可運用于研究蛋白質在植物細胞中的亞細胞定位,具有簡單、和通用性的特點。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;這樣,若在熒光顯微鏡下看到細胞內某一部位存在GFP信號,說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達到了確定某物質亞細胞定位的目的。可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。
武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;近年來,基因工程技術被廣泛應用于提高植物的耐鹽性,將抗逆基因導入優良大豆品種,培育抗逆高產新品系,為解決這一問題提供了新途徑。可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。