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低溫生物菌種——菌種分離方法

組織分離法

先將所需的藥用真菌采集回來(lái)，選取新鮮、個(gè)體大、壯實(shí)、中齡及無(wú)病蟲(chóng)害的子實(shí)體（或菌核、菌索），作為分離用的材料。若為子實(shí)體，取其菌蓋或菌柄組織；若為菌核，取其全部或部分（如茯苓）菌核；若為菌索，取其部分根狀菌索（如蜜環(huán)菌）。再用75 %酒精進(jìn)行表面消毒2 分鐘，用無(wú)菌水（或冷開(kāi)水）沖洗數(shù)次，洗凈殘留的藥液后切成小塊。，然后，放入PDA 培養(yǎng)基的試管或培養(yǎng)皿上，置24 ～26℃溫度下，培養(yǎng)5 ～ 7 天。在分離的真菌組織周?chē)?jiàn)長(zhǎng)有白色菌絲時(shí)，應(yīng)及時(shí)將菌絲移至斜面試管培養(yǎng)基上，再置溫度24 ～26 ℃下培養(yǎng)7～10 天，即得純菌種。所得的純菌種還可繼續(xù)擴(kuò)大培養(yǎng)或保藏。

微生物菌種的作用

刺激作物生

有些微生物肥料中的微生物還可分泌植物類(lèi)物質(zhì)、維生素等，刺激和調(diào)節(jié)作物生長(zhǎng)發(fā)育。例如，固氮菌等能夠產(chǎn)生多種活性物質(zhì)(生長(zhǎng)素、環(huán)己六醇、泛酸、吡哆醇、硫胺素等)，固氮菌培養(yǎng)物中可檢測(cè)到3-乙酸；熒光假單孢菌的所有菌株均能產(chǎn)生赤素和類(lèi)赤素物質(zhì)，部分菌株還能產(chǎn)生乙酸，少數(shù)菌株能合成生物素和泛酸；叢枝菌根真菌能誘導(dǎo)牧草植株產(chǎn)生細(xì)胞分裂素(CTK)，改變脫落酸(ABA)與赤素的比例。

低溫生物菌種的特點(diǎn)

種類(lèi)明確，作用清楚

微生物肥料起作用的微生物必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的鑒定，其分類(lèi)地位明確，對(duì)人、畜、植物無(wú)害，也不會(huì)破壞土壤微生態(tài)環(huán)境。例如，某些假單胞菌在生長(zhǎng)和代謝過(guò)程中，可以產(chǎn)生促進(jìn)植物生長(zhǎng)的物質(zhì)，但也產(chǎn)生某些有害物質(zhì)，有的甚至是人、動(dòng)物或植物的病原菌，這類(lèi)微生物就不能作為微生物肥料。事實(shí)上，曾有使用未經(jīng)嚴(yán)格鑒定的微生物而造成危害的教訓(xùn)。“有效、無(wú)害”是生產(chǎn)、施用微生物肥料的原則，許多國(guó)家對(duì)此有明確的立法。