您好，歡迎來到易龍商務網！
發布時間：2021-10-01 21:03
【廣告】
低溫生物知多少？
實驗室的傳代保藏過程
1. 按說明書要求復溶菌粉，轉種于適當的增菌培養基內（G1），復壯后轉接至平板上，并于適當溫度下培養適當時間，分離出單個純種菌落，此為第2代（G2）。
2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉接斜面作為工作用。此時，保藏為第2代，但工作用則為第三代。
3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。
4. 取一支冷凍保存的G2代轉種于平板和斜面培養基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用（W3）。
5. 將第三代（G3）冷凍或低溫保存，將生長、轉種后的G2經滅菌處理后丟棄。
6. 當工作用代數小于5時，可直接用上一代工作用轉接下一代工作用，如W3可直接轉接為W4。
7. 按上述程序操作，直至G4轉為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復上述操作程序、保藏和使用。
以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。
低溫生物菌種的發展趨勢
生產成本低、應用效果好
我國長期大量施用化肥，使單位化肥量的增產量下降，因此有效合理施用化肥，提高化肥利用率已成為一個重要課題。因此，增加有機肥、微生物肥料的施用不再是權宜之計，而是降低農民投入，提高產品品質、減少環境污染，取得較大的經濟、社會和生態效益的一項有效措施。
生產無公害食品、減少環境污染的需求
無公害食品對當今的農業提出了更高的要求。人們對農產品的數量和質量也提出來更高的要求。隨著國內外積極發展綠色農業(生態農業)，生產安全、無公害的食品成為一個發展趨勢，這就為開發生產好品質的微生物肥料提供一個好的發展機遇。并且由于濫用化肥引起的土壤質量下降，地下水污染等問題日益突出，無污染的微生物肥料的綜合作用更顯示出它的應用優勢和良好的發展前景 。
低溫生物菌種——常用菌種介紹
側孢芽孢菌
在延遲期， 短芽孢菌為革蘭氏染色陰性，菌體呈細長的桿狀；在對數生長期，為革蘭氏染色陽性，菌體成短而粗的桿狀；在靜止期，革蘭氏染色又轉為陰性，菌體成細長的桿狀，偶爾也能觀察到橢圓形的芽孢。圖1是50號菌用1%H2SO4(pH6.8)負染后的電鏡照片：菌體桿狀、周生鞭毛、大小約0.88μm×2.2μm。
作為非脊椎動物的病原菌，有關研究人員曾報道了這種細菌的殺線蟲能力，由于所報道的這些側孢短芽孢菌菌株都不產生伴孢晶體，所以這些菌株的殺線蟲毒力因子并非來自于具有特征性的伴孢晶體。然而，Smirnova TA，et al.分離到了2株能形成大的伴孢晶體的側孢短芽孢菌菌株，這兩株菌顯示出很強的殺昆蟲能力，研究證實，這種能力與菌體在形成芽孢過程中的伴孢晶體相關。有趣的是，Singer的實驗表明，一株側孢短芽孢菌的殺線活性源于一個熱穩定蛋白的毒性。所有這些研究表明，不同側孢短芽孢菌菌株擁有不同的線蟲致病因子。牛秋紅研究小組分離到的側孢短芽孢菌G4菌株具有顯著的殺線蟲功能，但其并不產生伴孢晶體。從該菌株的發酵液里提取的粗蛋白酶液在12h內能殺掉所有測試線蟲并在24h內完全降解。從側孢短芽孢菌G4菌株中純化出的絲氨酸胞外蛋白酶可水解多種底物，包括膠原和線蟲體壁，具有很強的殺線蟲能力，組織病理電鏡實驗證實這種蛋白酶嚴重破壞了線蟲體壁。而且，蛋白酶將線蟲體壁分解成為一些氨基酸或小肽，這些營養物使病原細菌更好的生長繁殖。該蛋白酶基因異源表達的菌株表現出了明顯的殺線蟲活性，重組蛋白酶在體外對線蟲體壁降解，而蛋白酶缺失菌株喪失了大部分的殺線活性，死的線蟲在生測中保持了完整的體壁，表明蛋白酶在線蟲侵染中起主要作用。
生物菌種存活必備條件
1、保持土壤合理濕度
高溫悶棚前，菜農多進行土壤翻耕，使得澆水水量極大，土壤濕度過高，通透性差，影響生物菌的增殖。因此，悶棚澆水時，要先起壟，澆小水保證土壤較為濕潤即可，不要大水漫灌。
2、閉棚后不要立即升溫
底肥需要生物菌發酵，若翻入土壤后立即澆水升溫，多數菌種被扼殺，僅有少量嗜熱菌可以存活，但糞肥發酵僅靠嗜熱菌是完成不了的。
建議菜農翻地澆水后間隔幾天，待土壤濕度降低，生物菌大量繁殖后再覆蓋地膜、關閉通風口進行悶棚，此時低溫菌種已經發揮作用，可以產生大量熱量輔助悶棚，可大大改善悶棚效果。
3、促進生物菌快速繁殖
想要促進微生物快速增殖，可使用菌種含量高的菌劑，例如20億的，可充分發揮菌劑作用。菜農要學會換位思考，生物菌喜歡什么樣的條件，就創造什么樣的條件，如此才能確保悶棚效果。
