隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離。液相色譜儀成為解決生化分析問題有前途的方法。由于液相色譜儀具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域。接通載氣當(dāng)色譜柱與進(jìn)樣口接好后,通載氣,調(diào)節(jié)柱前壓以得到合適的載氣流速。液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯和多核芳烴等,液相色譜儀連用也發(fā)展很快,如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。液相色譜儀的維護(hù)與維修 ,液相色譜儀常見故障與排除方法 : 泵:單向閥 現(xiàn)象:柱壓波動(dòng)范圍很大。原因:單元向閥污染或閥內(nèi)進(jìn)入氣泡引起。污染使得球與閥座密封不嚴(yán),液流倒流,壓力不穩(wěn),或球與閥座粘在一起阻死。氣泡進(jìn)入閥中會(huì)緊貼在閥體的一側(cè),使球難以返回到閥座,引起倒流,使壓力和流速變化范圍大,有時(shí)甚至為零。措施:對于污染用不同極性的一系列溶劑沖洗有可能解決問題,如用25mL水依次沖洗。或拆下進(jìn)出單向閥放在10%的液內(nèi)超聲清洗30~60min,若仍不解決問題則要更換單元向閥。對于閥內(nèi)進(jìn)入氣泡不必弄清氣泡存在何處,只要打開泄液閥大流速?zèng)_洗就可解決問題,在沖洗泵時(shí)可用扳手迅速打開泵頭上的輸出管路,以促進(jìn)氣泡排出。
購買的小技巧: 液相色譜儀等分析儀器都有相應(yīng)的國家指標(biāo),所以我們購買液相色譜儀一定先看是否滿足標(biāo)準(zhǔn),在選擇廠家以及型號方面多做對比,才能選擇出適合自己使用且性價(jià)比高的儀器。液相色譜儀的指標(biāo)比較多,包括檢測器的、泵的等等,他的主要指標(biāo)有漂移、定性定量重復(fù)性、小檢測濃度和噪音,下面我們就看看這幾項(xiàng)的選擇。色譜柱是進(jìn)行色譜分析的主要儀器,色譜柱的正確安裝才能保證發(fā)揮其的性能和延長使用壽命。 我們先看漂移的指標(biāo),我們首先需要了解什么是漂移,漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時(shí)間內(nèi)基線漂離原點(diǎn)的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢,好的儀器會(huì)在很短時(shí)間就能穩(wěn)定,提高分析效率。定性定量重復(fù)性主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo),這對于分析樣品來說是非常重要的,好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分的。小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,小檢測濃度就越大,靈敏度就越低,某些廠家回避了這個(gè)指標(biāo),說明他們不愿在小檢測濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會(huì)導(dǎo)致基線不穩(wěn),甚至影響分析結(jié)噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大,檢測的靈敏度就越低。制備液相色譜儀的功能: 泵形式:串聯(lián)雙柱塞浮動(dòng)式密封圈。 泵頭自沖洗功能。 “自吸式單向閥”技術(shù),可延長密封圈使用壽命。這也是我們常說的液相色譜儀至少一周要開機(jī)一次的原因(我們做液相一定要有“微滲”的概論)。 程序化的溶劑類和壓縮因子,可自動(dòng)補(bǔ)償。 完整的預(yù)清洗功能,更于快速溶劑更換。 制備液相色譜儀主要用于以下領(lǐng)域: 1、天然化學(xué)、中藥化學(xué):這是國內(nèi)目前廣泛的使用方法,為了弄清楚植物中的微量有效成分,開放手工色譜柱早已不夠用了,幾乎每個(gè)搞天然藥化的實(shí)驗(yàn)室都至少有一臺(tái)液相,土豪實(shí)驗(yàn)室人手一臺(tái)液相。 2、蛋白純化:相對于前者,蛋白純化的起步要稍微晚一點(diǎn),但是發(fā)展很迅速。同時(shí),由于外國儀器廠家在這個(gè)領(lǐng)域的優(yōu)勢不算太大,目前國內(nèi)也在這個(gè)領(lǐng)域加快發(fā)展,搶占地盤。 3、雜質(zhì)純化:由于合成工藝并不能做到100%的產(chǎn)率,往往伴有副產(chǎn)品,如何獲得微量的雜質(zhì)并確定結(jié)構(gòu)和含量,這就得靠液相色譜。 4、手性化合物的制備:這個(gè)主要是有機(jī)合成和方法學(xué)的在用。